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1。2。4水稻中海藻糖含量的测定

水稻生长2个月后，待抽穗时取各组水稻叶鞘进行烘干处理，每组重复3次。将200 mg烘干后的水稻叶鞘放入研钵，加入液氮充分研磨，称取20 mg水稻粉末装入新试管。采用郭永霞方法进行海藻糖的提取[14]。用PBS缓冲液（pH = 5。8）将40 mM的海藻糖溶液分别稀释为1。6、0。8、0。6、0。4、0。2、0。1、0。05 nmol/L的标准溶液。然后取10 μL的标准液或海藻糖提取液进行如下步骤，加入10 μL  1%  H2SO4，90 ℃水浴10分钟，在冰上冷却3分钟，加入10 μL 30%的NaOH，再于90 ℃ 下水浴10 分钟，冰浴3分钟后，加入200 μL显色剂（0。02 g蒽酮、10 mL 80% H2SO4），加热10 min，冰浴冷却后立即在630 nm下用722分光光度计测定OD值。最后根据标准曲线计算海藻糖含量。文献综述

1。2。5 水稻中海藻糖酶活力的测定

分别在各组水稻抽穗时取新鲜叶鞘，采用郭永霞的海藻糖酶提取方法[14] ，每组重复3次。标准曲线的制作，利用PBS溶液稀释标准葡萄糖溶液，稀释浓度分别成0。02、0。04、0。06、0。08、0。10 μg/μL。然后取50 μL的标准液或酶提取液进行如下步骤，加入75 μL 40 mmol/L 海藻糖和165 μL PBS，37 ℃水浴60分钟，然后进行4 ℃ 1000 rpm离心10 分钟，取50 μL上清液加入100 μL 葡萄糖分析剂，37 ℃水浴30分钟，再加入100 μL 2 mol/L H2SO4终止反应，在540 nm下用722分光光度计测定OD值。最后根据标准曲线计算海藻糖酶活性。

1。2。6 水稻中葡萄糖含量的测定

称取20 mg新鲜叶鞘研磨得到的粉末装入新试管内，每组重复3次。加入20 mM磷酸盐缓冲液2 mL后（PBS，pH 5。8），然后在超声波细胞粉碎机中振动30 min后，4 ℃，1000 rpm，10 min。随后，取50 μL上清液，加入50 μL 0。6 mol/L高氯酸，以除去溶液中的蛋白质， 4 ℃，3000 rpm，5 min。取50 μL的上清液，加入450 Μl 0。2 mol/L磷酸钠缓冲液（pH 7。4）。样品溶液中加入200 μL的显色试剂和150 μL的葡萄糖氧化酶，37 ℃ 水浴5 min。用光谱仪测定在625 nm处的吸光度，根据标准曲线计算出样品溶液中的葡萄糖含量。