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1。5。2好氧反硝化细菌的初筛

将上述分离得到的菌株接种到100mL牛肉膏蛋白胨液体培养基中，30℃、160r/min摇床培养活化24h，取50mL菌液，于5000r/min离心10min，弃上清，再用0。85%生理盐水洗涤沉淀，再次离心，如此重复3次，以去除菌体产生的无机氮素，最后用10mL生理盐水制备菌悬液，取1mL接种到100mL反硝化培养基中，30℃、160r/min摇床培养48h。取1mL培养液，加入少量格里斯试剂混匀，观察颜色变化。当培养液中滴入A、B液后，若溶液变为棕色、橙色、红色等表示亚硝酸盐存在；若无红色出现，则可加1-2滴二苯胺试剂，此时如反应后呈蓝色，则表示培养基中有硝酸盐，无亚硝酸盐；如果反应不呈现蓝色，表示硝酸盐和亚硝酸盐都已还原成其他物质[20]。