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[2] 加热并溶解

将上一过程中过滤好的滤液再一次置于干净的锅中，按照配方加入葡萄糖20 g，呈碎屑状的琼脂15g。混合好之后，把锅放在已准备好的石棉网之上，用小火慢慢加热的同时，为了防止在加热过程中，由于琼脂的特性出现糊锅或者溢出的现象，用玻璃棒不停地搅拌，使其受热均匀，便于溶解。最后定容至1000 ml。

[3] 三角瓶分装

准备好多个500 ml的三角瓶，将配置好的PDA培养基分装在 这几个三角瓶中。在分装的过程中为了不让培养基不遗留在瓶口从而造成污染，可以选用三角漏斗放置于瓶口，把培养基从三角漏斗中倒入。（注意：在分装的过程中一定要控制分装量，将固体培养基控制在整个三角瓶容积的一半为宜，灭菌后将培养基倾倒一定角度，制成斜面。）

[4] 三角瓶加棉塞文献综述

在各培养基分装完毕后，在三角瓶口上塞上高温灭菌过的棉塞或者泡沫塑料赛，从而防止外界空气中的微生物随空气流动进入培养基中大量繁重最终污染培养基，此外还可以保证三角瓶的通气性。

[5] 三角瓶包扎

在对三角瓶进行加塞处理后，为了防止在高温灭菌后急速冷却时将早已准备好的牛皮纸用牛皮筋外包在棉塞上，固定。同时在三角瓶的外侧用记号笔标明所配置的培养基的名称，组别以及配置日期。

实验所用试剂：Taq DNA polymerase；PCR产物克隆试剂盒；常用化学试剂。