磷酸盐对长期处于饥饿条件下的厌氧氨氧化菌内源代谢的影响(3)_毕业论文

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磷酸盐对长期处于饥饿条件下的厌氧氨氧化菌内源代谢的影响(3)

表1总结了各种试验条件。在活性测定中加入NaNO2和(NH4)2SO4(二者均为100 mgL-1)(图1)。每个结束时,注入50 mgL-1NH4+-N和NO2--N以测定anammox活性(SAA)。随后,取出5 mL anammox颗粒污泥进行血红素测定,5 mL污泥用于EPS提取。

1。3血红素提取和测定

将5 mL的anammox颗粒污泥在4℃3000 g的条件下,离心5min,然后用磷酸钠缓冲液(10 mM,pH7。5)洗涤两次。洗涤后加入25 mL的相同缓冲液中并通过超声处理破碎(800 W,在4℃下20 min,超声波处理器CPX 750,美国)。细胞在4℃下离心(15,000 g)15 min。另外,根据Berry and Trumpower所述的方法测定heme含量。

1。4 EPS提取

EPS提取采用热提取方法。多糖(PS)测量以葡萄糖标准物使用硫酸蒽酮方法,蛋白使用以牛血清白蛋白作为标准物的改进的Lowry方法。

1。5生物衰减速率的测定

生物衰减速率基于减量在厌氧饥饿中的VSS水平。根据一阶指数衰减模型,该模型广泛适用到活性污泥系统,如硝化和anammox系统,衰减率使用公式(1)计算。

bAN=(lnVSSt/VSS0)/t                  (1)

其中VSSt是在饥饿后的VSS(gL≥1),VSS0是饥饿前的VSS(gL-1),bAN是衰减速率(d≥1),t是饥饿时间。

表1 适用于每批实验的条件汇总

实验 饥饿时期 (30 d)

浸没在含磷酸盐缓冲液的无机盐中,第10天和第20天注入基质

浸没在无机盐中,第28天没有注入基质和磷酸盐(1mM)

浸没在无机盐中,第28天没有注入基质和磷酸盐(50mM)

浸没在无机盐中;第10天和第20天注入基质,第28天注射磷酸盐(1mM)

浸没在无机盐中第10天和第20天注入基质,第28天注射磷酸盐(50mM)

图1活性测定使用的实验方案文献综述

如上图所示方案1-3:具有或不具有磷酸盐的持续饥饿;方案4-6:间歇饥饿有或无磷酸盐;使用持久性;方案7-8:间歇性静息细胞;方案9-10:预暴露于磷酸盐。

时间(d)所示。从指数衰减方程 (1),定义为半寿命(THL)如式 (2)

tHL=ln2/bAN                                              (2)

1。6分析方法

氨氮,亚硝酸盐,pH,悬浮固体(SS)和VSS使用标准方法测定。

1。7统计分析

所有生理和物理化学指标一式三份,结果表示为平均值±标准差。方差分析用于分析结果的差异性,统计学上p<0。05表示显著显着。Pearson相关分析以确定anammox的生理和物理化学方面的颗粒特性。

(责任编辑:qin)