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摘    要 目的 繁殖和鉴定Isl2/LacZ双基因同源基因重组。方法：将Isl2基因与LacZ基因通过同源基因重组的方式培养出的质粒注射到受精卵中，将胚胎移植到代孕母鼠体内，经过培育得到杂合子与纯合子小鼠进行饲养和繁殖，提取母体中胚胎期小鼠，取其尾部的DNA，用PCR方法扩增小鼠DNA在通过检测子代小鼠基因型，通过对LacZ染色的结果分析可以分析Isl2的分布与含量，从而进行进一步对Isl2基因在体内的作用，当今研究中，该基因可在大脑，脊髓，视网膜，耳蜗里面有表达，如果敲除该基因会导致这些位置在胚胎发育期出现畸形，如果将这个基因在全身敲除，小鼠胚胎会在出生第一天死亡。该基因是否表达和表达量的研究有助于我们了解试听等方面的病因与缺陷。90159

毕业论文关键词：Isl2/LacZ; 同源基因重组; 敲除源Q于W优E尔A论S文R网wwW.yOueRw.com 原文+QQ75201,8766

Abstract Purpose of breeding and identification Isl2 / LacZ double gene homologous recombination。 Methods: Isl2 genes and LacZ gene by homologous recombination way to c μLtivate a plasmid injected into a fertilized egg, embryo transfer to a surrogate mother, through c μLtivating heterozygous and homozygous mice feeding and breeding, extract the maternal embryonic mice, take its tail DNA, DNA using polymerase chain reaction (PCR) amplification mice in mice by detecting the offspring genotype, through the analysis of the res μLts of LacZ staining can analyze the distribution and content of Isl2, thus further to the Isl2 the role of genes in the body, the study, the gene in the brain, spinal cord, retina, cochlear with expression, if the knock out that gene can lead to these positions in embryonic development deformity, if the genes in the whole body knockout, mouse embryos will die on the first day was born。 Whether the gene expression and expression of research helps us to understand the pathogeny of audition, etc and defects。 

Keyword：Isl2/LacZ ; Homologous gene recombination ;knock out

目  录

目  录 4

第一章   引  言 5

1。1 背景介绍 5

    1。1。1大脑、脊髓、来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 视网膜（视神经）的意义 5

   1。2 基因敲除原理 7

   1。3  Isl2-LacZ基因简介 7 

   1。4 大脑、脊髓、视网膜（视神经）疾病 7

第二章   实验试剂及仪器 9

    2。1 实验仪器 9

    2。2 实验试剂 10

第三章  实验方法 11

    3。1小鼠的特性与实验规范 11

    3。2 DNA采集与提取 13

    3。3 引物设计 14

    3。4 聚合酶链式反应（PCR） 14

    3。5 琼脂糖凝胶电泳 16

    3。6 小鼠解剖 16   

第四章  实验结果 17

    4。1 琼脂糖凝胶电泳成像分析。 17

第五章  总结。18

参考文献 (责任编辑：qin)