耐盐基因GmMYB130在大豆根中的过量表达研究(4)_毕业论文

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耐盐基因GmMYB130在大豆根中的过量表达研究(4)

MYB130的全长

MYB transcription factor MYB130 Q0PJG6 Glyma01g40220。1 

>Glyma01g40220。1 CDS   897bp

ATGGGTGCTCCTAAGCAGAAATGGACCGCAGAGGAAGAAGCAGCATTGAAAGCTGGAGTAGTCAAACACGGGGCTGG来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 TGGCGCACCATACTTACAG

ACCCAGAGTTCAGTTCCATTTTGCGCATGCGTTCAAATGTAGATCTCAAGGACAAATGGAGGAACATAAATGTGACAGCAATATGGGGATCGAGGCAGAA

AGCAAAGCTAGCTCTT来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 AGAACCTACTACCATCCACC来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 TTGACAATAACCACTTGGCCTTGAGTACTGTAGTTCAACGTGACAAAGAAGTTGCA

AATCCCAAGCCTTTGGCAGTTTCTAGTGGGACATCTCCTAATTCAAAGG来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 AATATCGAAGCTACAGAACTTCCAGTTGGATAATCTTATATTAGAGT

CCATTATCAAGTTGAAGGAGCCAAGGGGTTCTGACCAGGCAGCAATTGCTGCATATATAGAGGATCAATACTGTTCTACGCCGACCCTCAGAAAGTTACT

GTCAAC来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 CTGAAGCACATGGTGGCTAGTGG来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 TTAATGAAGGTAAAGCATAAGTACAGGATTGCAACAAATTTAACAATATCTGAG来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 GAAGA

TGCTCTTCCCTGTTACTCCTGGAAGGGAGGCCCAAAGATTCTCC来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 GCAGAGAAGACTGGTGTCAACATCCTTTC来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 TCCGAAATTGATGCAGAGC

TATCG来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 TGAAGGGTGTGACACCTCAAGAGGCTGCGGCGGCAGCTGC来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 GCAGTTGCAGAGGCAGAAGCTGCCATTGCCGAGGCTGAGGCAGCAGC

TAGGGAGGCAGATGCTGCAGAAGCCGAGGCAGAGGCTGCACGAGTGTTTGC来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 GCAGCAATGAAAGCACT来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 TGCAAGACACTTCGTATTTGA

2.实验方法

2。1 大豆植株总RNA的提取(Trizol法)

本研究采用康为世纪的植物RNA提取试剂盒进行大豆总RNA的提取实验。

实验步骤:文献综述

1)事先将研钵用5~10 mL 95%的酒精消毒,并点燃。燃尽后,用液氮将研钵充分预冷,取约0。5 g大豆根,研成粉末;

2)为防止RNA降解,趁粉末自然液化之前,迅速转入1。5 mL离心管(约至0。7~0。8 mL高度)中,加入700 µL Buffer RL和7 µLβ-巯基乙醇(100:1),混匀,并漩涡震荡充分混匀,室温放置5分钟,使之充分裂解。

3)将所得裂解液转入2 mL Shredder Spin管(RNase-Free,Collection Tube)中,4℃12000 rpm离心4 min,在转移根和茎样品裂解液时可将枪头尖端剪去,便于取样。将离心后的上清液转移到新的1。5 mL离心管中(记录上清的体积),加入0。5倍体积的无水乙醇,迅速混匀,提取核酸。

4)混合后的溶液转移到已装入收集管(Collection Tube 2 mL)的吸附柱Spin Column RM中,4℃10000 rpm离心30 S,弃掉滤液,将吸附柱重新放回到收集管中。加入350 µL Buffer RW1,4℃10000 rpm离心1 min,弃掉滤液。

(责任编辑:qin)