冰缘苔藓植物的黄酮总含量测定(3)_毕业论文

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冰缘苔藓植物的黄酮总含量测定(3)

1号冰川形成于第三冰川纪,距今已有480万年的历史了。由于现代冰川类集中,冰川地貌和沉积物非常典型,古冰川遗迹保存完整清晰,所以1号冰川有“冰川活化石”之誉,成为我国观测研究现代冰川和古冰川遗迹的最佳地点。这里的地貌特征十分特殊,使得热衷于科学考察的研究者们能够尽情地探索此地长久以来的发育过程。

由于中国科学院天山冰川观测试验站的存在,使得科学界与公众都对1号冰川的退缩状况有较为清晰的认识,相关科研成果与新闻报道也较为广泛。新华社2010年7月13日消息中说:“研究发现,当地年平均地温上升明显,由1993年的-1。6℃上升到2008年的-1。0℃。估算2008年的多年冻土下陷深度为86。8米,较1992年减少了7。7米。”“研究人员还发现,多年冻土活动层的变化与河源区夏季(5~10月)的水热状况密切相关,活动层厚度随融化指数、夏季降水量的增加而增大。研究人员同时推断长期持续的气候变暖,是导致乌鲁木齐河源区多年冻土升温的主要驱动力。”当这类消息一次次地出现,人们对于1号冰川发展发育、存在存亡就更加关注了。1号冰川一直处于消退状态,在1962-2006年的40多年里,其面积减少了0。27平方公里,并呈加速减少的趋势。

及时地制止天山一号冰川的消融消退已经迫在眉睫,当地政府表示,将建立一号冰川保护区域,尽自己所能地去保护冰川消退区内的珍稀野生动物以及当地艰难生长的植物资源。其中,组成高山冻原植被的主要植物类群苔藓就是急剧减少的珍稀植物资源中的一种[2]。

2。2 材料处理

野外采样样本通过了一系列的剪除、筛选、阴干来达到初步分离纯化的目的,再对初步分离纯化的苔藓样本进行二次清洗、二次分离及纯化、阴干,并将其置于烘箱中进行48小时彻底烘干、保存。最后即可得到绿色无其他杂质的苔藓样本,用以黄酮提取以及黄酮总含量的测定。并在显微镜和解剖镜下对所采样的所有原始样本进行形态观察与图像摄取,通过参考相关资料及对照标本进行苔藓样本的的种类鉴定。最终确定了18种,20份不同的苔藓样品用以实验。

2。3 仪器药品

    蒸馏水(单蒸水和双蒸水);芦丁(中国药品生物制品检定所);乙醇(A。R);亚硝酸钠(A。R);硝酸铝(A。R);氢氧化钠(A。R)。紫外-可见分光光度计(购自上海欣茂仪器有限公司);芦丁(中国医药集团山海化学试剂公司提供);超声波发生器(频率20kHz);移液器,真空泵,研磨皿,电子天平,恒温水浴锅(购自上海欣茂仪器有限公司)

2。4 实验方法

2。4。1 苔藓样品黄酮的提取(超声波提取法)文献综述

黄酮类化合物具有独特的物理、化学等特性,由于这些独特的性质,其提取方法也较为多样,而近年来国内外对于利用不同方法对黄酮类化合物进行提取的研究有不少报道。目前,在众多提取方法中,较为常用的几种为:溶剂法、超声波法、微波法、酶解法以及超临界提取法这五种方法。其中,植物黄酮类化合物的提取最为普遍的是超声波法,超声波提取法是一种具有能耗低、效率高、不破坏有效成分等特点的使用较为广泛的提取方法,其原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外,还利用其次效应,比如机械振动、扩散、击碎等,使其加速被提取成分的扩散、释放,该法设备简单,操作方便,大大缩短了提取时间,并且提高了有效成分的提取率和原料的利用率。

超声波提取是利用超声波空化作用加速植物有效成分浸出的提取,具体的提取方法如下。首先,用电子天平秤准确称取事先清洗烘干,并用液氮仔细研磨粉碎的苔藓样品粉末1g于100ml锥形瓶中,加入25ml 60%乙醇,混匀,于预热50℃的水浴锅内水浴2h,使黄酮充分溶解于溶液中。冷却后,超声提取40min,并对其进行抽滤,收集含有黄酮的滤液,滤出的滤渣再次置于锥形瓶中,加入25ml 60%乙醇,再在50℃水浴锅中水浴2h,重复以上超声40min提取和抽滤的过程,得到第二份滤液,将所得的两次滤液合并,弃去滤渣,之后得到样品液总量V。 (责任编辑:qin)