毕业论文移动版

3730型DNA测序仪测序过程中，模板的纯度和浓度、引物和测序循环反应条件都会对测序结果产生重要影响[2~4]。有研究表明，测序成功的关键是测序模板的纯度，大多数测序失败都是由于模板纯度不够所致[5]。应该使用质量可靠的试剂盒，即可保证模板质量。在设计测序引物时，除了要遵守一般的引物设计原则外，要特别注意引物的长度不能过长，这样不仅可以控制引物的Tm值，还可以降低引物的合成成本。测序反应条件的优化可以使测序反应适用于不同的模板，获得稳定的测序结果。乙醇沉淀法方便、快速、经济，是首选的纯化方法[5]。虽然目前对测序质量影响因素的研究有很多，然而对样品板和测序胶保存时间影响测序结果的研究还鲜有报道。

本研究在熟悉3730测序仪工作原理与特点的基础上，分析了该仪器测序过程中样品和测序胶保存时间对测序质量的影响，为进一步提高DNA测序的成功率及准确性提供实践参考。

2  材料与方法

2。1  主要仪器设备文献综述

（1）3730Xl DNA测序仪（Applied Biosystems）

（2）离心机（cence湘仪L550）

（3）PCR仪（PTC-100）

（4）移液器（Labnet®）

（5）96孔样品板（Applied Biosystems）

（6）96孔橡胶垫（Applied Biosystems）

（7）96孔样品板基座（Applied Biosystems）

（8）96孔上盖（Applied Biosystems）

（9）ATF分析软件(Conexio GENOMICS,Wesrern Australia)

（10）Graphpad6。0医学绘图软件

（11）超纯水仪

2。2   主要试剂

（1）10× Buffer（Applied Biosystems）

（2）超纯水 

（3）POP-7 Polymer (Applied Biosystems) 

（4）Hi-Di Formamide(Applied Biosystems)