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行优化，得到复合酶法提取黄秋葵嫩果多酚的最佳提取工艺为:提取温度44.97℃，液料比(mL:g)58.80∶1，提取时间3.99h，预测多酚提取值为29.193mg/g，验证值为29.156mg/g。复合酶法提取植物活性成分，具有无污染、条件温和的特点，具有一定的研究价值。

（4）离子沉淀法离子沉淀法是以植物多酚能与某些可溶性金属离子生成络合物沉淀的性质为依据，使多酚可以从提取液中以沉淀物的形式分离出来，之后再通过酸溶解沉淀使多酚游离析出的一种方法。[33]其中盐离子沉淀提取法是制备高纯度多酚的常用方法之一。

易灵红等[33]以绿茶作为原料，水为浸提溶剂，采用离子沉淀法提取茶叶中茶多酚。从沉淀剂种类及用量、溶液用量、浸提时间和温度五个因素考察了对茶多酚提取的影响。结果表明，当以AlCl3为沉淀剂且m沉淀剂:m茶叶=1:5、溶剂用量m茶叶:m水

=1:20、浸提温度为水浴75℃、浸提时间45min时，茶多酚的提取率最高，为14.12%。传统的离子沉淀是应用重金属离子进行沉淀提取，如Sb2+、Pb2+重金属离子，在操作过程中该类离子会有残留，对人体造成伤害，医药以及食品行业难以接受[34]。现多采用Al3+、Zn2+及Al3++Zn2+等复合离子进行沉淀提取茶多酚。研究表明复合型离子作为沉淀剂茶多酚的提取率有所增加[35]。

离子沉淀法具有工艺简单、成本低、选择性强、产品纯度高等特点。但离子沉淀法的缺点是无机盐沉淀剂沉淀复溶时pH值变动较大，容易导致植物多酚的氧化破坏，因此操作工艺需要严格控制。此外，某些金属盐残留在产品安全性上存在隐患。

1.2.3植物多酚的分离纯化工艺

（1）层析法层析法是以样品组分在两相之间的分配系数存在差异为依据进行分离纯化的。

王明阳等[36]研究利用柱层析法连续提取葡萄籽油和多酚的最佳工艺条件，经过连续的提取收集，发现醚层中含有葡萄籽油，下层醇水液中含有多酚。连续提取的葡萄籽油和多酚的提取率均达到99%，经萃取一次将葡萄籽油和多酚分离，得率分别是97.6%和98.0%。柱层析法一次性连续分离纯化两种成分，操作步骤简便，节省了操作时间，有机溶剂用量较少，提取效率高，具有广泛应用价值。

（2）大孔吸附树脂法

大孔树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质)之间的分子间作用力即范德华引力，利用它巨大的比表面，进行物理吸附，使有机化合物根据吸附力、分子量大小差异，经一定溶剂洗脱从而分开；另一方面树脂具有一定的孔径，分子量大小不同的化合物通过树脂柱时，树脂对其具有一定的选择作用。孔径大小不同、极性不同的树脂对不同性质的化合物选择性不同，从而达到分离、纯化、除杂、浓缩等目的[37]。但是树脂的分离效果受多方面因素影响，如树脂的结构、被吸附物质的结构、洗脱剂性质、pH值、温度、原液浓度[38]等。

熊何健等[39]经过吸附、解吸试验,筛选出适合分离纯化葡萄多酚的大孔吸附树脂为AB-8，并确立纯化工艺参数。较佳动态吸附条件为上溶液多酚浓度3.0g/L，pH4.5，上样速率为3BV/h，较佳洗脱条件为乙醇浓度80%，洗脱速率3BV/h，在此条件下葡萄多酚纯化样品多酚含量为81.1%。

马乐等[40]通过吸附、解吸试验，筛选出适合分离纯化核桃青皮多酚的大孔树脂为NKA-9树脂，并对分离纯化条件进行优化。结果表明：吸附条件为上样液多酚浓度0.574mg/mL，pH1.0，上样速率1.3mL/min，吸附率可达90.1%；洗脱条件为体积分数50%的乙醇洗脱剂，pH3.0，洗脱速率0.43mL/min，解吸率达87.9%。

大孔吸附树脂在植物多酚纯化分离中在医药方面、食品领域和化妆品领域均有应用。随着人们生活观念的转变，含多酚类物质的化妆品也逐渐出现[41]。大孔树脂纯化多酚优点在于工艺简单、绿色无污染、能耗小，在各个领域都有很好的发展前景。 (责任编辑：qin)