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1 材料和方法

1.1实验仪器和实验试剂

本实验所用仪器和试剂均由周口师范学院生命科学与农学学院与神经生物学与转化医学重点实验室提供。

实验仪器：电子天平，量筒，解剖针，鼠笼，血糖仪

实验药品:可口可乐，PBS

1.2实验动物 

1.2.1.实验动物处理

本实验以C57BL/6J雄性未成年小鼠为实验材料。健康C57BL/6J雄性未成年小鼠12只，六周龄，体重16-18克，随机均分为饮水组和可乐组，前者对照组，后者为实验组，再分别将饮水组和可乐组的6只鼠随机平均分装在两个鼠笼里，每三只一笼，小鼠自由进食。每周检测体重，饮水量和摄食量。

1.2.2 实验动物随机血糖测定

1）实验前一天上午九点；

2）按照说明书调节血糖仪；

3）测定随机血糖：将小鼠从鼠笼中取出，使其俯撑于铁网格上，用消毒的剪刀剪掉小鼠尾巴末端约 1-2 mm，用手从小鼠根部轻轻顺压小鼠尾巴静脉至根部，让血液富集成一滴，用血糖仪测定随机血糖，静置25秒后读出数据；每次测血糖之前先挤出一滴血并弃掉，用第二滴血测血糖。

4）记录数据

1.2.3 实验动物禁食血糖测定

1) 在实验前一天下午六点将小鼠放入干净的鼠笼禁食不禁水16小时；

2）按照说明书调节血糖仪；

3）测定空腹血糖：将小鼠从鼠笼中取出，使其俯撑于铁网格上，用消毒的剪刀剪掉小鼠尾巴末端约 1-2mm，用手从小鼠根部轻轻顺压小鼠尾巴静脉至根部，让血液富集成一滴，用血糖仪测定禁食血糖，静置25秒后读出数据；每次测血糖之前先挤出一滴血并弃掉，用第二滴血测血糖；

4）记录数据。

1.2.4 实验动物重要组织的取材

（1）喂养小鼠9周后，颈椎脱臼处死小鼠。

（2）皮肤消毒：在小鼠腹部喷洒酒精消毒。 

（3）打开腹腔、胸腔：先用消过毒的手术剪将小鼠的腹部和胸部的皮肤剪开大约2cm，再将腹腔和胸腔剪开，仔细观察小鼠附睾脂肪，肝脏，脾，胰腺等内脏器官。然后用眼科剪将其小心分离取出，分别用PBS清洗三次用滤纸将水吸干后置于电子天枰上称重。

（4）记录数据，每组平均值为该组的脏器重量，做统计分析。

1.3 小鼠能量代谢检测

1.3.1 测定小鼠周进食量

1）供应饮水对照组和可口可乐实验组正常充足的食物；

2）实验第一天上午九点，更换新的垫料和鼠笼，称取鼠粮，记录为原始重量，保证水和可口可乐正常供应；

3）从第二天开始每天上午九点查看鼠粮，水和可口可乐的饮用情况，若有不足及时添加；

4) 到第八天上午九点，收集鼠笼内剩余的鼠粮并用电子天平称重，记录数据为最终鼠粮；

5）重复步骤2）和步骤4），连续检测9周；

6）最后统计实验所得数据，得到的每实验组平均值即为小鼠周平均进食量；

7）将实验所得数据制成柱形图，观察饮水对照组和可口可乐实验组小鼠周进食量的变化趋势。

1.3.2 测定小鼠周体重

1）供应饮水对照组和可口可乐实验组正常充足的食物，待小鼠适应新环境后再继续实验；

2）实验第一天上午九点，更换新的垫料和鼠笼，用电子天平称量小鼠体重记录为原始重量；

3）从第二天开始每天上午九点查看鼠粮，水和可口可乐的饮用情况，若有不足及时添加；

4) 到第八天上午九点，用电子天平再次称量小鼠体重，记录数据为最终体重；

5）重复步骤2）和步骤4），连续检测9周； (责任编辑：qin)