水稻斑马叶突变基因zebra leaf3的精细定位(4)
时间:2018-10-17 11:45 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
YSA 3 幼苗白化 PPR protein ysa mutant Su et al., 2012 PAPST1 1 缺绿 3’-phosphoadenosine 5’-phosphosulfate transporter1 papst1 mutant Xu et al., 2013 VYL 3 黄化转绿 OsClpP6 vyl mutant Dong et al., 2013 YLC1 9 幼叶黄化 a protein of DUF3353 superfamily ylc1 mutant Zhou et al., 2013 YGL2 6 黄绿叶 Heme Oxygenase 1 ygl2 mutant Chen et al., 2013 ZN 6 斑点叶- 绿黄相间 a thylakoid-bound protein of unknown function zebra-necrosis mutant Li et al., 2010 SPP 6 缺绿 the stromal processing peptidase spp mutant Yue et al., 2010 MPR25 4 浅绿 a pentatricopeptide repeat protein tos17 knockout mutant Toda et al., 2012 OsNOA1/RIF1 2 RNAi后 缺绿 nuclear-encoded cGTPase of likely prokaryotic origin 反向遗传 Liu et al., 2010 ObgC 7 缺绿 Spo0B-associated GTP-binding protein GTPase T-DNA insertional mutant Bang et al., 2012 CHR4 7 近轴白化 Mi-2 protein chr4 mutant Zhao et al., 2012 Ostrxm 12 RNAi后 浅绿叶 thioredoxin m 反向遗传 Chi et al., 2008 OsHAP3A ,OsHAP3B,OsHAP3C 1/5/5 RNAi后 浅绿叶 the A/B/C subuint of HAP3 complex 反向遗传 Miyoshi et al., 2003 1 材料与方法 1.1 材料 zl3是籼稻9311由化学诱变剂甲基硫磺乙酯（EMS）诱变获得的，经多代自交，其斑马叶性状能稳定遗传。将zl3与野生型籼稻9311种植于南京农业大学土桥水稻实验基地，并将zl3与02428配置杂交组合得到F1。同年，在海南陵水县种植F1并观察F1表型并获得F2种子。隔年，对F2群体中正常叶色和斑马叶水稻株数进行数据统计。 1.2 植株表型的鉴定 水稻斑马叶突变体是由籼稻9311经EMS诱变产生的。籼稻品种9311、突变体zl3以及突变体与粳稻品种02428配制的F2群体种植于南京农业大学牌楼教学实验基地和培养箱中，待表型明显期，挑选极端单株用于基因定位。在大田条件下，叶片在发芽后5天和8天剪取叶片并观察表型，幼叶表现为淡绿色且有斑马条纹，随着温度的变化以及幼苗的生长叶色恢复为绿色，但与野生型相比，叶色仍稍淡。 1.3 农艺性状的调查 野生型和zl3突变体生长到抽穗后期，分别调查它们的株高、穗长、剑叶长宽、倒二叶长宽、有效穗数；收获后，穗子50℃烘干，调查每穗粒数、千粒重以及结实率；每个性状10个重复。 1.4 遗传分析 配置杂交组合9311/zl3和zl3/9311，将获得的F2群体种植于培养箱中，调查每个组合中野生型表型和突变体表型的个数，进行遗传分析。 1.5 光合色素含量测定 叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量的测定采用Su 等（2012）的方法，具体步骤如下：横向剪取光照培养箱中野生型9311和突变体zl3相同叶龄的叶片30mg左右，碎片约2mm长，设置3个重复，每个样品中加入5ml的96%的酒精提取液，室温黑暗放置48 h，期间多次轻摇混匀，之后离心机12000rpm/min离心10 min去除残留的植物组织残渣。上清用紫外分光光度计（Beekman DU800 USA）测定波长为663 nm、645 nm和470 nm处的吸光值并进行记录。叶片单位鲜重或单位面积的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量的计算采用Lichtenthaler（1987）的方法。每批试验样品都重复3次测量并求平均值。计算公式如下： (责任编辑：qin) |