木霉漆酶基因的原核表达研究(3)
时间:2019-09-03 12:46 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
（5） 考马斯亮蓝R-250染色液 考马斯亮蓝R-250 0.5g 异丙醇 125mL 冰醋酸 50mL 用蒸馏水溶解，定容至500mL（会有些许颗粒残留，可用滤纸除去颗粒物质），室温保存。 （6） SDS-PAGE凝胶脱色液 无水乙醇 25mL 冰醋酸 50mL 用蒸馏水溶解，定容至500mL，室温保存。 1.3.3 菌种的活化 按分子克隆的操作活化菌种如下： ① 将菌种（转入了大肠杆菌DH5α的重组质粒PET52b-Laccase）冻藏管置于冰上解冻，但不要待其融化完（避免反复冻融菌种而致使菌种死亡），无菌操作下（超净工作台）用接种环将少许菌液划线于加有抗生素Amp（50ug/mL）的LB平板复壮，并将冻藏管马上放回-80℃冰箱。 ② 将平板置于37℃恒温培养箱培养过夜，第二天挑取单菌落即可。 ③ 挑选茁壮的菌落，接种到液体培养基LB（含Amp，50ug/mL）中培养37℃，180rpm过夜培养，并进行二次活化，得到生长良好活性高的菌落。 (责任编辑：qin) |