硝普钠浸种对渗透胁迫下豌豆种子萌发过程中抗氧化代谢的调控(3)_毕业论文

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硝普钠浸种对渗透胁迫下豌豆种子萌发过程中抗氧化代谢的调控(3)

1.4.2 α-淀粉酶活性的测定

参照刘萍和李明军的方法进行[6],稍作修改。

   (1)α-淀粉酶液的制备 

取1g已萌发的豌豆种子放在研钵里面,首先加5mL 0.1mol/L研磨缓冲液,仔细研磨均匀,倒进试管中,再加5 mL研磨缓冲液冲洗并倒进试管中,然后70℃恒温水浴20min,在此期间需要不断的摇动试管,以钝化β-淀粉酶。水浴完成,取出并冷却,放在转速设定为4000r / min的离心机里,离心5min,吸取上清液,用0.1mol/L研磨缓冲液进行定容,定至10mL即可,此溶液即为α-淀粉酶制剂。作为酶制剂储存在4℃冰箱中备用。

(责任编辑:qin)