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1.1.1制备少突胶质前体细胞的方法

    少突胶质细胞在神经元轴突周围可以形成髓鞘，神经冲动可以在神经轴突上能够快速的传递论文网，所以在再生医学界十分地受关注，越来越多的研究者通过不同的方法来制备少突胶前体细胞原因是少突胶质前提细胞能够成为成熟的少突胶质细胞。研究的方法越来越简便并效率高，下面介绍几种已研究过的方法。

    利用振荡分离法：谢丽娟等研究者在2000年通过利用振荡分离法来探索出获得高纯度的少突胶质前体细胞的方法[5]。 具体为取新生大鼠大脑原代配合胶质细胞培养大概为7~10天，再用振荡分离及差速贴壁法纯化少突胶质前提细胞，再用添加了N2 supplement、血小板衍生生长因子（PDGF）、碱性成纤维素细胞生长因子（bFGF）的无血清培养基进行培养，用免疫荧光法对细胞表面抗原进行鉴定。最后得出的结果是原代培养48h后细胞出现分分层，02A祖细胞分散位于星形胶质细胞单层面上。混合胶质细胞培养时细胞完全分层的出现是振荡分离OA祖细胞适宜的条件。分离纯化的O2A祖细胞经无血清化学条件培养基培养后分化为少突胶质细胞，其他的细胞不再生长。

在这个实验中得出的结论是这个实验建立少突胶质细胞的培养方法，可获得纯化的少突胶质细胞，能满足进一步的实验需要，为阐明早产儿PVL发病机制提供丰富的实验资源。

通过振荡分离方法来制备少突胶质细胞的研究者比较多，范明，何平[8]等研究者也在同一年通过振荡，免疫荧光检测来制备并鉴别少突胶质前体细胞。

    利用不同浓度的bFGF来研究培养少突胶质前体细胞的方法：刘永[11]等人在2013年通过添加不同浓度的bFGF来研究少突胶质前提细胞的培养方法，目的在于岁少突胶质前体细胞分分离方法进行改良，为了以后细胞的移植治疗研究提供了基础，主要的方法是在大鼠少突胶质前体细胞分离纯化培养过程中添加不同浓度的bFGF(5、10、20ng/ml),在显微镜观察少突胶质前提细胞在体外生长的情况，台盼蓝实验检测细胞存活率和获得率，免疫细胞化学技术进行细胞鉴定，流式细胞术检测细胞纯度。刘永做出的试验中得出的结果是在少突胶前体细胞培养过程中添加10ng/ml的bFGF，可以提高少突胶质前提细胞的产出和纯度，分离的少突胶质前体细胞A2B5、NG2阳性，能进一步分化成为少突胶质细胞且表达MBP和04

刘永等研究者做出的实验的结论是在培养中添加适当浓度的bFGF的方法能有效获得高纯度的少突胶质前提细胞。

    用摇床和免疫荧光等方法来制备少突胶质前提细胞：李彩虹等研究者在2014年通过摇床的方法来制备少突胶质前体细胞[13]。目的在于探讨大鼠脊髓少突胶质前提细胞的分离纯化及诱导分化的方法。具体的方法为去出生后3天内的SD大鼠脊髓，采用0.125%的胰蛋白酶消化获取原代混合胶质细胞，培养10天左右而且在37摄氏度恒温摇床采取180r/min摇速振摇并且差速贴壁40分钟获得纯化的少突胶质前提细胞，取纯化后培养三天的少突胶质前提细胞免疫荧光鉴定细胞纯度或优化分度。

李彩虹等研究者的实验结果是采用胰蛋白酶消化法获取原代混合胶质细胞、振摇并差速贴壁法分离纯化能够的得到纯度较高的少突胶质前提细胞，折光性强，呈双极或三极形态，免疫荧光染色百分之95细胞表达为A2B5和NG2。利用这种方法的结论是采用振摇差速贴壁法可以从脊髓损伤中分离纯度比较高的少突胶质前提细胞，获取的少突胶质前体细胞体外生长稳定，经过诱导可以分化成为比较成熟的少突胶质细胞。 (责任编辑：qin)