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实验材料与方法

1. 材料

1.1 实验动物

本次实验的实验动物均是购于花鸟市场，运回实验室后立即将中华龟卵放入设定好温度的培养箱过夜。

1.2 试剂

草甘膦（草甘膦异丙胺盐，41%水剂）由上海慧光化学有限公司提供。实验时用蒸馏水将实验药物配制成一定浓度的母液，现配现用。标准蛋白溶液；双缩脲试剂、南京建成生物工程研究所提供的试剂盒；定磷剂；pH=7.4浓度为 60nmol/L的磷酸盐缓冲液；基质液、钼酸铵

1.3 理化条件

实验用水为经48h自然曝气的自来水，水温为（27±1.5）℃，pH=7.3，水质符合渔业水质标准(GB-11607-1989)[14]。

生理盐水

1.4 仪器

离心机、可见分光光度计、恒温培养箱

2. 实验方法

2.1 中华龟卵的孵化

将中华龟卵放入0、50、200、800、3200、12800 mg/L的浓度中浸泡30秒，以消除蛋壳表面一些不确定因素的干扰。浸泡后，立即将中华龟卵放入放有蛭石的玻璃罐内并贴好标签。放置好后，玻璃罐被随机放入温度设定为27℃的恒温培养箱内。并在每个玻璃罐内放入一块在相应浓度的草甘膦溶液里浸泡过的毛巾，以帮助保持水分。每日用草甘膦溶液喷洒两次，并有规律的旋转玻璃罐，用以消除培养箱内由于位置不同而引起的温度和湿度变化的影响，持续孵化一星期，记录孵化出幼体的个数。