微囊藻毒素的提取及其生物降解研究(4)_毕业论文

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微囊藻毒素的提取及其生物降解研究(4)


性肠胃炎。1996年,在巴西Caruaru市一所血透析医院的肾透析治疗中心,由于
误用了被MCs污染水作为透析用水,结果导致116人中毒、52人死亡,该事件
在国际上引起了极大震惊[10]
。如果人们经常接触含有毒素的水体,MCs 还会诱
发人患肝炎并促发肝癌。
总体说来MCs引发的人类急性中毒症状也是多种多样,以肠胃炎最为常见,
其次是肝损伤和呕吐等症状。同时为了保证人类饮用水的健康安全,1998 年国
际卫生组织(WHO)推荐了饮用水中 MCs 含量的允许标准为 1μg/L。该标准在当
时只被少数国家接受,后来越来越多的国家接受了这个标准。在 2001 年,我国
卫生部也接受了这一标准。 1.2.3  微囊藻毒素的分析检测
(1)高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HLPC)
HLPC法是检测MCs常用的方法之一,它检测准确度高,结果的重现性好。
MCs 的最大紫外吸收波长为 238nm,利用二极管阵列紫外光检测器可获得更多
MCs的光谱信息,与 MCs的标准品进行对照。但是由于MCs都显示相似的紫外
光谱特征,所以二极管阵列紫外光检测器对MCs的定性鉴定能力是有限的。
分析中采用的固定相和流动相对样品中MCs单体的分离影响很大。等度洗脱
和梯度洗脱都能够将MCs单体分离。目前广泛应用的高效液相色谱法采用反相
C18色谱柱,以含有0.05%的三氟乙酸的乙腈溶液和含有0.05%的三氟乙酸的水
溶液进行梯度洗脱。三氟乙酸作为离子配对剂能够调节流动相的极性,达到更好
的分离目的[11]。
(2)薄层色谱法
薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,薄
层色谱法设备要求低,操作简单、方便、快速,具有较好的灵敏度。
(3)毛细管电泳法
毛细管电泳法是一种色谱分离技术,根据分子的大小以及所带电荷来分离
样品,其分离效率高、速度快、所需样品少、成本低及自动化程度高。该法灵敏
度不及HPLC法,但是其所需样品量少,适用于小体积样品。
(4)核磁共振法
MCs的结构可由核磁共振确定,近年出现的二文核磁共振技术可以确定已知
的或未知的MCs结构。但核磁共振技术的缺点是需要大量的纯化样品,不能广泛
地应用于常规分析[12]。
1.2.4  微囊藻毒素的生物降解
(1)混合菌对MCs的降解
由于自然水体、泥土和沉积物中普遍存在着大量能降解MCs的微生物, 国
内外很早就开展了混合菌群对MCs降解的研究。Cousins研究了自然混合菌群对
MC-LR的生物降解,在实验室中用水库水对低浓度MC-LR( 10μg/L)进行了实验,
结果在不到一周的时间内,MC-LR即发生降解;吕锡武等人[13]
采用序批式生物膜反应器对3种MCs进行了降解实验(初始浓度均为数百μg/L),  经过24h的好氧生
物处理后,3种毒素降解率都在90%以上。由于混合菌群对MCs总体降解能力不
高, 所以需要进一步分离出能够降解MCs的纯菌株。
(2)好氧性MCs降解菌
目前国内外已经发现了多种能够降解MCs的微生物,而且分离出的纯菌株对
MCs的降解能力有很大的提高。1994年,Jones首次从澳大利亚的水体中分离出
了MCs降解菌,定名为MJ- PV [14]
。接着,Park从日本的Suwa湖水中分离出了一
种能降解MC-RR、YR和-LR的菌株Y2,Y2对MC-RR和LR的最高降解速率分别
达到每天13. 0和5. 4mg/L  。闫海从滇池底泥中分离出了5种菌种,但未对其作属
的鉴定。吴涓等人[15]
从巢湖水体中分离出菌株M9,在pH为7.0、外加碳源、氮源 (责任编辑:qin)