木霉1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶（ACCD）的分离纯化及功能
时间:2017-05-07 11:06 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
| 摘 要：木霉的ACCD酶可以切断植物激素乙烯的前体ACC产生酮戊二酸和氨，降低植物的乙烯含量从而促进植物生长，提高植物的抗病性。采用硫酸氨分级沉淀的方法对来自木霉ACCD酶进行了分离纯化，然后用不同浓度的ACCD酶处理大豆植株。结果表明ACCD酶对大豆具有明显的促进作用。大豆的生长指标（根长，株高，茎粗，干重和湿重）和生理指标（POD活性，SOD活性，CAT活性）在ACC浓度为0.0005g/ml，0.001g/ml，0.0015g/ml和0.002g/ml时依次缓慢上升，在0.002g/ml的浓度处达到最高值，在0.002g/ml浓度之后的0.0025g/ml和0.003g/ml大豆的生长指标和生理指标表现为逐渐下降。关键词：木霉；ACCD；分离；纯化；功能8260 Separation, Purification and Function of Amino Cyclopropane- 1-1-carboxylic Acid Deaminase（ACCD）from Trichoderma Abstract: Amino cyclopropane-1-1-carboxylic acid deaminase (ACCD) fromTrichoderma could cut the ethylene precursor (ACC) of plant hormone to produce ketoglutaric acid and ammonia to, and then lower ethylene content and promote plant growth, furthermore, to improve the disease resistance of plants. At present, ACCD enzyme was separated and purified using the ammonium sulfate fractionation method. Then ACCD was used to treate soybean plants. It was showed that the ACCD enzyme had a significant effect on soybean growth. The growth indexes , such as root length, plant height, stem diameter, dry weightand wet weight, as well as resistant enzymes indexes (POD activity,SOD activity, CAT activity) rised slowly with the ACC concentration rising, and the best optimal concentration was 0.002g/ml. When the concentration reached0.0025 g/ml the rising tends of soybean growth index and physiological index declined gradually. Key words: Trichoderma；ACCD；Separation；Purification；Function 目 录 摘 要 1 关键词 1 Abstract 1 引言 1 1 材料与方法 2 1.1 试验材料 2 1.2 试验设置与处理 2 1.3 仪器和设备 3 1.4 ACCD酶的分离纯化 3 1.4.1 活化木酶菌株 3 1.4.2 收集菌丝 3 1.4.3 ACCD酶的诱导分离和纯化 3 1.5 大豆生长指标的测定 4 1.5.1 大豆株高、茎粗的测量 4 1.5.2 大豆干重、湿重的测定 4 1.6 大豆生理指标的测定 4 1.6.1 POD活性的测定 5 1.6.2 SOD活性的测定 5 1.6.3 CAT活性的测定 7 2 结果与分析 7 2.1硫酸铵分级盐析饱和度的确定 7 2.2 ACCD酶对大豆生长指标的影响 8 2.3 ACCD酶对大豆生理指标的影响 10 2.3.1 ACCD酶处理对大豆POD活性的影响 10 2.3.2 ACCD酶处理对大豆SOD活性的影响 10 2.3.3 ACCD酶处理对大豆CAT活性的影响 11 3 结论 11 参考文献 13 致 谢 14 木霉1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶（ACCD）的分离纯化及功能引言 木霉菌是一类具有重要经济意义的生防菌，普遍存在于土壤、植物根围、叶围、种子和球茎等生态环境中[1]。木霉菌具有广泛的适应性、广谱性及多机制性，一直是植病生防学领域的研究重点，是国际上认可的较为理想的一类生防菌，也是迄今为止研究和应用最多的一类生防菌[2]。 (责任编辑：qin) |