毕业论文移动版

硝普钠是一种常用的NO供体。NO是一种极易扩散的气体自由基[15] 。近年来的研究表明NO（一氧化氮）是广泛分布于植物组织和细胞一种重要信号分子，不仅参与植物的光形态建成，种子的萌发、植物的衰老，而且一氧化氮也参与植物对逆境胁迫的响应 [16-17]。近些年,关于一氧化氮在植物生理方面的作用，研究者做了大量工作，研究发现在逆境胁迫下适当浓度的一氧化氮可增强植物的抗逆性[18]。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1实验材料 甘薯品种：徐32

1.1.2甘薯苗的培养与处理

（1）选取生长有3~4个叶片甘薯幼苗栽培于营养钵中，每个营养钵内栽培一株甘薯幼苗。室温下培养2周。

（2）室温下培养2周后将甘薯幼苗分为两组（A组，B组）其中A组为实验组B组为对照组，A组喷洒硝普钠溶液（0.5mmol/L），B组用蒸馏水处理，连续喷洒处理两天，每天上下午各喷洒处理一次。在喷洒第二天后用15%PEG浇灌实验组和对照组甘薯苗模拟干旱环境。

（3）在硝普钠溶液处理后第2天取甘薯叶片测定各项指标，作为-2天，依次在PEG溶液处理的第零,二,四,六,八天对甘薯叶片进行测定。

1.1.3试剂

（1）95%乙醇

（2）碳酸钙

（3）石英砂

（4）蒸馏水

（5）10%三氯乙酸

(6)0.6%硫代巴比妥酸 

(7)酸性茚三酮溶液

(8)3％磺基水杨酸

(9)冰醋酸

(10)甲苯

(11)脯氨酸

(12)0.05mol/L pH7.0磷酸缓冲液。

(13)0.2mol/L H2O2溶液：30% H2O2 11.36ml溶于磷酸缓冲液中，定量至250ml。

(14)0.5mol/L Tris-Hcl缓冲液（pH7.0）。

(15)反应混合液

(16)100mmol/L PH6.0磷酸缓冲溶液：取10.6010g NaH2PO4和14.198g Na2HPO4各加入蒸馏水定容500ml，接着取NaH2PO412.3ml、Na2HPO487.3ml混匀。

（17）15%PEG溶液

（18）0.5mmol/L硝普钠溶液

（19）20mmol/LKH2PO4

1.1.4仪器

电导仪；紫外分光光度计；冷冻离心机；研钵；容量瓶；刻度吸管；恒温水浴锅；电子天平秒表；试管；移液枪；滤纸；漏斗；电磁炉

1.2实验测定项目与方法文献综述

1.2.1叶绿素含量的测定

方法：取0.3g甘薯叶片，加3ml乙醇研磨，用漏斗过滤，过滤结束后用95％乙醇定容到25 m l。在波长665nm和波长649nm下测定吸光值。根据计算公式，计算叶绿素含量。

Ca=13.95A665-6.88A649  Cb=24.96A649-7.32A665   CT=Ca+Cb 

Ca表示叶绿素a的浓度（mg/l）

Cb表示叶绿素b的浓度（mg/l）

CT表示叶绿素总浓度（mg/l）

1.2.2脯氨酸含量的测定

配制不同浓度梯度的标准脯氨酸溶液，绘制脯氨酸溶液标准曲线，研磨甘薯叶片用磺基水杨酸抽提脯氨酸，对从甘薯叶片提取出的脯氨酸进行提纯，用甲苯调零,在520nm波长处进行比色。根据标准曲线，计算脯氨酸含量。

计算公式如下：

样品中脯氨酸含量（%）＝ 

X为测定液中脯氨酸含量（ug/2mL);

VT为提取液体积（mL);

VS为测定是取用的样品体积（mL)；

W为样品质量（g)。

1.2.3电导率的测定

方法：分别取实验组和对照组同等质量的甘薯叶片，用蒸馏水冲洗干净，取两只烧杯各加入蒸馏水100ml，用电导仪测定蒸馏水的电导率R1，将冲洗干净的对照组和实验组甘薯叶片分别置于烧杯中，用R2表示浸泡过甘薯叶片的蒸馏水电导率（浸泡45分钟），用R3表示煮沸甘薯叶片蒸馏水电导率（煮沸30分钟）。

电解质渗出率=( R2-R1)/(R3-R1) (责任编辑：qin)