植物保卫素在水稻抗稻瘟病中的作用(3)
时间:2021-08-30 21:44 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
2 材料与方法 2.1 材料及试剂 2.1.1 植物调节剂制作 取水稻材料淮籼015(明恢86作受体亲本,和D415经连续7代标记辅助选择回交育种而成的株系),当淮籼015幼苗喷施稻瘟病菌混合生理小种6小时后,再喷施茉莉酸甲酯。待24小时后取叶片和茎秆,液氮中研磨成粉末。取500克粉末加入2升提取液(二氯甲烷:丙醇=2:1),充分摇动后静置4-5个小时。取有机相真空浓缩。将有机相上样到C18层析柱(CombiFlash Rf, Teledyne ISCO)中,分别用水、1:1水和甲醇混合液、100%甲醇洗脱,流速50mL/min,收集液真空浓缩。浓缩液再经过一次水和甲醇的梯度洗脱,收集液再真空浓缩。浓缩液经65%甲醇洗脱,收集洗脱液,该馏分富集组份B;经85%甲醇洗脱,收集洗脱液,该馏分富集组份C;经88%甲醇洗脱,收集洗脱液,该馏分富集组份A。上述馏分真空干燥,然后溶解在乙酸乙酯中,接着上样到LC-Si SPE柱,用1:1乙酸乙酯和己烷洗脱,收集的馏分再真空浓缩,得到组份A,组份B,组份C。 3. 组成 植物调节剂 1份,十二烷基磺酸钠8份,木素磺酸钠6份,高分散硅酸2份,高岭土80份; 所述的植物调节剂由质量比为1:1:1的组份A,组份B和组份C组成; (责任编辑:qin) |