IsI1/IsI2双敲除小鼠模型的基因型分析(4)
时间:2022-01-06 21:56 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
1-1神经元的结构图 1。1。5神经系统主要功能 1。神经系统在人体内具有主导作用,它具有调节和控制人体各个器官和系统功能的作用,应对外界环境的变化它可以做出协调和反应的功能。 ⒉神经系统参与人体生命活动的方式多种多样,其主要的功能是使人体在面对外界不断变化的环境时候,使人体保持相对稳定的一种状态。 ⒊随着环境不断地变化,人体的各个部分也在不断地进行着进化和演变,人的大脑不仅可使形成语言中枢,还有运动中枢。在此同时,人类还产生了特有的思维方式,这些都是神经系统的高度发育而形成的。 1。2 Isl1/Isl2 基因简介 Isl1 LIM-同源结构域转录因子,他被识别为开始是增强胰岛素基因结合蛋白,它含有该基因Isl1假外显子,其位于小鼠染色体V,人类外显子3染色体上。从小鼠胰腺β细胞识别的实验研究Isl1,而是因为它是编辑一个新的选择,所以这个功能在困难的必然选择新的间接结果的结果予以确认。 同时,家族的另一成员是小岛的存在所属Isl2,Isl2老鼠是染色体XV,位于九载人体内的染色体。在实验研究中,我们发现,在小鼠中,Isl1和Isl2展览重叠,它们之间,Isl2更有限的重叠基因表达的现象。 Isl1一起构成在不同基底节神经发育表达模式,它表现为多种细胞类型的结构,包括神经元,周围神经系统,以及各种神经结构的显影神经系统。在研究中发现,Isl1胰腺发育Isl1基因还需要一个特殊的结构前脑胆碱能神经元元子集,它存在于视神经细胞一个非常特殊的位置。 Isl1在神经发育系统中,感觉神经信号基因程序,这是在神经系统中,可以确保生存和至关重要的重要作用的神经元分化的发育协调正在播放。增长是第二个标志和Isl1人类心脏祖细胞的增殖和分化特性,为各种细胞活动提供保护。因此,我们认为Isl1调节过程亦起着心脏发育中起重要作用。通过我们的实验中,我们发现,分泌胰高血糖素的分泌,生长激素对心脏的分泌也有促进胰岛素Isl1的发展产生了积极的作用。论文网 第二章 实验原理 2。1 基因敲除原理 基因敲除技术是从分子水平上对一个基因进行敲除或进行替代,然后根据实验小鼠所发生的表型对其尽心筛选,鉴定和分析,然后推测一个基因功能的试验方法。它是基因组学研究中的重要研究工具 基因敲除技术是应用DNA同源重组原理发展起来的对基因组学研究起推动作用的一种工具。基因敲除技术是通过胚胎干细胞,分离和体外培养的成功及哺乳动物细胞中同源染色体重组的前提条件下为基础发展而来的。基因敲除主要包括下列技术:①构建重组载体;②将重组DNA转入受体细胞的细胞核内;③筛选目的细胞;④得到转基因动物。 在基因敲除中,主要有插入性载体系统和替换性载体系统两种传统的载体系统。首先来看插入性载体系统,插入性载体系统主要包括插入的基因片段,同源序列片段,替换基因的启动子,报道基因的成分所组成。再来看替换性载体系统,替换性载体系统则主要包括这些,同源序列片段、替换基因的启动子、报道基因等成分所组成。正负双向的筛选策略和传统方法,其中基因敲除需要满足条件有:基因组的提取处理可以通过构建载体所需要的达靶区两侧不具有特异性的足够长的同源片段所组成,然后通过southern印迹法来进行分析Isl1/ Isl2基因的特性;同源重组区域外侧基因在随机重组时的活性会发生改变,使打靶结构外的特异基因在合适的酶切位点。而在重组的过程中会发生基因位置的改变,这属于PCR中特殊序列的技术问题,同时还有许多其他方面的弊病。而最近几年发展起来的Cre/10xP重组系统从不同层面上解决了上述基因敲除中出现的弊病。 (责任编辑:qin) |