基于细菌群体感应活性的植物内生菌和叶际菌的筛选和初步研究(3)
时间:2022-03-03 21:29 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
1。2。2基于寡肽的QS 革兰氏阳性菌通过分泌到环境中的寡肽来调节QS诱导的基因表达。这些小(<10个氨基酸)的胞外肽(自诱导肽,AIP)通过一个两组分的信息系统发挥作用。在革兰氏阳性菌中,枯草芽孢杆菌的QS至少有4个部分负责细胞交流。在这4个部分中存在的差异有ComX(一种胞外信息素)和ComP(组氨酸激酶)的传感区域的位置[11]。同样地,金黄色葡萄球菌的Agr系统也分成4个不同的部分来发挥作用。该系统的各个组分保持着各自的独特性。 1。2。3其他的QS系统 在有些细菌中我们观察到QS系统存在自然变异,它们不能合成自身的信号分子,但是能对其他菌产生的信号分子做出反应:(i) 大肠杆菌,拥有SdiA,LuxR的同系物,(ii) 洋葱比克霍尔德菌,存在于囊胞性纤维化患者中,能对铜绿假单胞菌产生的QS信号分子做出反应。在一般情况下,QS被认为能给细菌提供进化优势,包括抵抗环境压力能力的增强,以及跟竞争者竞争能力的增强[12]。在白色念珠菌的QS系统中,一种真核的真菌病原体导致了金合欢醇的产生,这对酵母细胞转换成菌丝体形式是必要的,而这种转变对于它的毒力行为是至关重要的。 1。3 QS引起的担忧 其中显得突出的主要担忧在于由感染的细菌引起的基于QS的生物膜的形成。囊包性纤维症患者健康状况的恶化,就是由于伯克霍尔德菌和假单胞菌的不断增长。渔业部门最惧怕的鱼类致病菌——嗜水气单胞菌,鳗弧菌,哈氏弧菌和鲁氏耶尔森氏菌,它们也是通过QS系统来表达自己的致病性。同时发现,生物膜也影响其他领域的处理效率,如农业,水产养殖业,饮用水处理(生物污染)和污水处理厂等。在饮用水的生产,废水的再利用和海水淡化的过程中广泛使用的反渗透膜上形成的生物膜,造成了直接的经济损失。在这些情况下,生物膜是由军团菌属和其他主要属于γ-变形菌的细菌——埃希氏杆菌属,假单胞菌属和根瘤菌属之间的相互作用形成的。文献综述 1。4 群体感应的抑制 QS的过程可以通过以下几种不同的机制进行破坏:(i) 降低AHL同源受体蛋白或AHL合酶的活性,(ii) 抑制QS信号分子的产生,(iii) AHL的降解,(iv) 主要通过人工合成的信号分子类似物来模拟信号分子,从而实现对群体感应的竞争性抑制。在这些不同的可能性之间,酶促降解QS信号分子(AHLs)被认可并应用的最多。用抗体和诱骗受体来抑制QS信号已被认为是一种新的抗感染治疗的方法之一[13]。 1。4。1 用于检测QS信号的细菌报告基因和QSI的筛选 解决基于QS的相关细菌耐病问题的一个最重要的前提是耐病菌QS系统的检测。由于微生物体产生的QS信号的不断变异,使得对群体感应信号的检测就显得意义重大。为了建立原因和效果之间的关联,AHL和AI-2的报告基因得到了较好的研究与开发。这些生物监测菌株能对QS信号如AHLs进行灵敏的、定量的、实时的检测。在大部分目前已知的生物监测菌株中,QS 调节的启动子被融合成lux操纵子或lacZ。虽然这些报告菌株有功能调节蛋白,但是它们缺乏AHL合酶。这些启动子的活性被外源的QS信号所诱导。这里,受体因AHLs的存在而激活,AHLs结合到它同源的LuxI启动子上并启动特定基因的表达。相关基因的表达程度正比于信号分子的浓度。简言之,它用某些容易识别的表型模拟了自然的QS系统。虽然每个报告菌株可以检测一组QS信号,但是它们之间互补可以检测到更宽范围的AHLs,甚至是AHL的类似物或模拟物[11]。紫色色杆菌对于有4—6个C的酰基侧链的QS信号分子具有高灵敏度。具有pSB410的大肠杆菌对检测有6—8个C的侧链的QS信号分子有效,而有pSB1075的大肠杆菌对有10—14个C的侧链的QS信号分子敏感。紫色色杆菌CV026生物传感器无法检测AHL的3-羟基衍生物,在阐明荧光假单胞菌可能存在的例子中是有帮助的。另一个对于长链AHL抑制剂的筛选同样有效的生物传感器是根癌农杆菌NT1。它在pTiC58的tra1基因上融合了一个lacZ,可以被诱导产生β-半乳糖苷酶。5-溴-4-氯-3-吲哚基β-D-吡喃半乳糖苷(X-gal)的降解会导致蓝色的出现。这种生物传感菌株最好的部分在于它可以对多种低浓度的AHLs做出反应。第三类报告菌株需要识别的QSIs可能对长链的AHLs——C16-C20发挥作用,它的代表是苜蓿根瘤菌Rm41。一个最近发现的能检测长链AHLs的报告菌株是紫色色杆菌VIR24,它来源于紫色色杆菌模式菌株ATCC12472[14]。在从天然资源中有效的筛选无毒的QSIs并阐明它们的作用效果中,包括高通量的遗传工具在内的体外方法已被证明是有效的。来`自+优-尔^论:文,网www.youerw.com +QQ752018766- (责任编辑:qin) |