脂肪组织总蛋白提取方法的建立和优化(2)
时间:2022-05-23 22:36 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
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5。讨论 29 致谢 30 参考文献 31 1。绪论 1。1 蛋白质 蛋白质是由氨基酸的氨基和羧基通过脱水缩合形成肽键连接起来的生物大分子,是生物体基因的转录和翻译所表达的产物。两个以上功能相关蛋白质所组成的蛋白质复合体可以发挥某种特定的功能,是目前蛋白质组研究的重要对象。 蛋白质与核酸、多糖和其他生物大分子一起参与了细胞生命活动,其中最典型的蛋白质是酶,它既能催化加速生命体体内的化学反应,又能调节反应速率,对生命体的新陈代谢起到重要作用;另一些重要的肌球蛋白和肌动蛋白等机械性蛋白质可以参与肌肉的收缩。细胞信号传导和免疫反应都需要蛋白质的参与[1]。 1。2 蛋白质组论文网 蛋白质组(Proteome)这一名词是由Wilkins在1994年首次提出的,是蛋白质(protein)和基因组(genome)两个单词的结合,是指由一个基因组或一个细胞、组织表达的所有蛋白质[2],是一个整体性概念。 蛋白质所拥有的自身特定的生命活动规律是无法直接从基因组的信息中表达出来[3],任何细胞中基因组都是完整的,组成有机体的不同细胞都使用同一个基因组。在有机体的新陈代谢过程中,不同的细胞其基因组基本不会改变;然而蛋白质却不一样,同一个细胞在不同时期,所表达的蛋白质也千差万别,即使知道了生物体全套基因的表达,也不能完全解释其生命体活动的规律,因为基因是通过其中心法则转录翻译到蛋白质上,大部分细胞生命活动都发生在蛋白质层次上。特别是在真核生物中,其转录翻译的过程中会发生选择性剪接,导致蛋白质组是大于基因组的,例如:截止至2016年5月1日,在UniProtKB蛋白质数据库中查出人类蛋白质组由92179个蛋白组成,其中71173个是剪接变体[4]。 蛋白质组学技术是从整体的角度来研究蛋白质的特征,诠释了蛋白质与细胞生命活之间的规律[5]。 1。3 脂肪组织 脂肪组织(adipose tissue)主要由大量密集的脂肪细胞组成,存在着两种拥有不同颜色及生物学作用的脂肪组织:白色脂肪组织(White Adipose Tissue,WAT)和棕色脂肪组织(Brown Adipose Tissue,BAT)[6],也叫做白色脂肪和棕色脂肪,它们的特征颜色主要与线粒体性质和解偶联蛋白1(UCP-1)的含量有关。 1。3。1 白色脂肪组织 白色脂肪组织包含有一个被细胞质所环绕的脂滴,由于脂滴挤压细胞核,使其形状变为平扁且位于细胞质边缘。脂滴是由三酰甘油和胆固醇酯的半液体状态储存起来[7]。 白色脂肪组织除了存储甘油三酸酯之外,还可以作为内分泌器官分泌一系列的脂肪因子例如分泌瘦素和脂联素,可以用来调节其它器官组织,并且与大量的生理和代谢过程密切相关[8]。 1。3。2 棕色脂肪组织 棕色脂肪组织含有许多较小的液滴以及大量含铁的线粒体,这使得其呈现棕色的外观[9]。 棕色脂肪组织虽然可以储存甘油三酸酯,但是它的主要功能是氧化甘油三酸酯,并且在氧化过程中作为热量散发所产生能量,原因是因为棕色脂肪细胞中的线粒体数量高,以及解偶联蛋白1(UCP-1)的高表达;在偶联蛋白1激活后,可以作为内线粒体膜内的质子通道,将质子从膜间隙泵送回线粒体基质[10]。所以棕色脂肪细胞要消耗很多的氧气才能够产生大量的热量。 1。4 蛋白提取与制备 作为生命活动的物质基础,生物体内含有多种蛋白质,其性质差异也比较大,即使是同一物种,由于生长阶段不同以及处于不同的体系中,提取蛋白质所使用的方法差别也很大,所以不会有一个适用于所有蛋白质分离的提取程序。但是大部分蛋白质提取分离所采用的基本原理是相同的,其基本原理有两个方面:一是通过力的作用使含有蛋白质的混合物分配于不同组分或区域,从而进行蛋白质的分离,如电泳、超滤、差速离心等;二是利用蛋白质混合物中各个组分溶解度的差异,使其分配于多个组分中,如有机溶剂沉淀、盐析、萃取等。 (责任编辑:qin) |