4 展望 13

参考文献： 14

致谢 15

1。引言

1。1  研究的目的与意义

盐胁迫培养下存活和保证结果的能力便是水稻耐盐性。当水稻处于高浓度盐条件下时，不但水稻对摄取外界的水分的能力受到抑制，以至于水稻的生长发育缓慢，这就是盐胁迫的渗透效应。而且氯化钠进入呼吸链，钠离子在水稻叶片细胞累积很多，又进一步导致水稻叶片开花结果等发育的缓慢，这就是盐胁迫的离子效应[1]。同时，盐胁迫的水稻在机体内也产生应答，用以维护膜系统的稳定性，离子的区域化，渗透调节和水分子蛋白的积累等。论文网

水稻在盐胁迫实验条件下一般细胞质膜受到盐离子的胁迫影响而产生胁变，植物细胞质膜就会产生损伤。每当受到盐胁迫后，水稻细胞质膜的通透性、其在运输过程中所起到的作用、组成成分等都会与盐胁迫实验前表现出极大不同，具体为膜脂的通透性增加与过氧化作用增强，导致细胞质膜的正常生化生理功能受到损害，进一步影响细胞的代谢作用[2]。POD，SOD，CAT是水稻保护细胞生长的保护酶系统，彼此共同协作相互协调，清除产生的活性氧，从而保护了膜的构造[3]。耐盐的水稻会改变离子的吸收或者隔化来抵抗或减轻盐胁迫造成的损害。水稻植株在盐胁迫下通常表现为一系列病害症状，例如失水干枯，无分蘖发生、植株死亡，产量下降，叶片卷曲等。鉴定水稻种质耐盐性的基础就是这种水稻品种之间存在的对盐浓度的敏感度不同、表现差异或不同的适应能力。

为了更好研究水稻耐盐机理，我们以水稻叶衰突变体els2为材料，进行水稻种子的发芽，种植，待水稻长成幼苗后，进行盐胁迫反应。并开展SOD，POD酶分析及DAB染色等实验，对ELS2基因参与的耐盐性分子机理进行研究。

2 材料与方法

2。1  实验材料

2。1。1 材料

本实验所用材料为甲基磺酸乙酯(EMS)诱变籼稻蜀恢所获得的早衰且叶片有斑点的突变体els2。

2。1。2 试剂文献综述

预冷过的磷酸缓冲溶液（pH7。8）；甲硫氨酸（Met）； EDTA-Na2 ； NBT ；核黄素；NaN3；乙醇。

2。2 实验方法

2。2。1 DNA的提取方法

(1) 我们用剪刀取好5cm左右的水稻叶片放于2mL EP厚壁管当中，加入一粒钢珠作用是增大摩擦，并用液氮速冻且小心手冻伤，就放到全自动样品快速研磨仪中震荡研磨，设定频率35HZ，时间1min；拿出机器时候需马上打开管盖，防止爆管盖。

(2) 接下里要在磨好的水稻样品中都加入400μLtbsDNA提取液，震荡。在75℃水浴加热30min，每隔10min上下震荡一次；

(3)把样品放在在离心机中 在12000 rpm离心10min，吸取上清液到新的200μLEP管中；

(4) 又用移液器在上清中加入等量200μL再冰箱中放置预冷过的异丙醇，上下要摇晃混匀，需要在冰箱中放置5min，在离心机中在12000 rpm的速度下离心10min，去掉上清部分；

(5) 吸配制好的75%乙醇200μL到上述EP管中，用枪轻轻吸打使洗涤沉淀，8000 rpm离心5min，倒掉上清即酒精、风干（20-30min），加入200μL ddH2O，震荡放置-20℃备用保存。