硝化细菌通常是一类自养性细菌，包括亚硝酸菌和硝酸菌。在氮循环过程中扮演着很重要的角色。亚硝酸细菌(Ammonia-Oxidizing Bacterium, AOB)将NH4+-N氧化成N02--N，再由硝酸细菌(Nitrite-Oxidizing Bacterium, NOB)将NO2--N氧化成N03--N[2]。近年来, 研究者在各种环境中分离并鉴定了一些特殊的菌株，这些菌株可以利用有机物生长并进行硝化作用，在好氧条件下将氨/铵或有机态氮氧化为羟胺、亚硝酸盐和硝酸盐[3]，被称为异养硝化菌。相对于传统的自养硝化细菌，异养硝化细菌生长速率快、细胞产量高、需溶解氧浓度低，且可以同步进行硝化反硝化作用。因而其脱氮工艺更简洁、经济有效，引起越来越多研究者的注意[4]，所以近年来异养硝化细菌的选育成为热点。论文网

本研究以一株异氧硝化细菌TT1为研究对象，通过设置不同的碳源，C/N，温度，pH 和溶氧量，研究菌株TT1硝化脱氮的最佳条件，期望获得最高效的氨氮去除效果。

2 材料与方法

2。1 菌株：异养硝化细菌TT1，本实验室分离保藏。

2。2 培养基

异养硝化细菌培养基：(NH4)2SO4 0。5g, NaNO2 0。5g, 柠檬酸三钠 9。0g, 维式盐 50ml,补充蒸馏水至1L, pH 7。0。 其中维式盐溶液：K2HPO4 5。0g,MgSO4 •7H2O 2。5g，NaCl 2。5g，FeSO4•7H2O 0。05g，MnSO4•4H2O 0。05g,补充蒸馏水至1L。

2。3仪器设备

WH861型漩涡振荡器（江苏太仓华利达实验室设备公司）；GI54DS型高压蒸汽灭菌锅（厦门致

微仪器有限公司）；FPG系列多段可编程光照培养箱（宁波莱福科技有限公司）；微量移液器（德国Eppendorf）；5417R型高速冷冻离心机（德国Eppendorf）；冰箱（Hair集团）；电子天平（Mettler Toledo PL203）；pH计（Mettler Toledo DELTA 320）；电热鼓风干燥箱（101-2型）。

2。4菌株生长曲线

将菌株接种到100mL异养硝化培养基中，置于30℃，160r/min恒温摇床培养。每隔4h取样测定培

养液的OD600。

2。5 氨氮去除特性实验

2。5。1 碳源

将基础培养基的碳源分别设置为乙酸钠、丁二酸钠、葡萄糖、柠檬酸三钠（改变碳源含量维持C/N为11），其余成分不变。取菌悬液1mL，分别接种到100mL不同碳源的异养硝化细菌基础培养基中，设定pH为7。0、温度为30℃、转速为160r/min摇床进行培养24h后检测培养液的NH4+-N以及OD600。每组实验做三个平行样。

2。5。2  C/N 

根据上述结果选取最佳碳源，设置C/N分别为9、11、13、15、17，将菌株分别接入，设定温度为30℃、转速为160r/min摇床培养。定时检测培养基氨氮浓度的变化，每组实验做三个平行样。

2。5。3  pH 文献综述

在上述最佳碳源、C/N条件下，用HCl和NaOH溶液将基础培养基pH分别调为5。0、6。0、7。0、8。0、9。0,接入菌株，30℃、转速为160r/min摇床培养。定时检测培养基氨氮浓度的变化，每组实验做三个平行样。

2。5。4 温度

在上述最佳碳源、C/N和pH条件下，设置温度梯度为25℃、30℃、35℃、40℃，接菌培养，摇床转速为160r/min。定时检测培养基氨氮浓度的变化，每组实验做三个平行样。

2。5。5 溶氧量

摇床转速与培养基中溶解氧的浓度具有密切关系，转速越高，溶解氧浓度越高。

在上述最佳碳源、C/N、pH和温度条件下，将菌株接入基础培养基中，通过改变摇床转速来改变培养基的溶氧量。转速分别设为120r/min、160r/min、180r/min、200r/min。定时检测培养基氨氮浓度的变化，每组实验做三个平行样。