虽然目前已克隆到一些棉花纤维发育相关基因，但是纤维发育分子机制仍不清晰， 本论文通过cDNA-AFLP分离司笃克氏棉、亚洲棉和体细胞杂种后代（S4）中纤维发育全发育期的差异表达基因，系统地分析了不同棉种转录水平的表达差异对纤维品质形成的重要影响；并结合基因表达分析和转基因手段对差异表达基因进行功能验证，发掘不用棉种中优良的纤维发育调控关键基因，初步阐明棉花纤维发育的分子机理。

1。2。2 果胶甲基酯酶（PME）及其抑制剂（PMEI）

果胶甲基酯酶又称为果胶酯酶。它在食品行业中有着广泛的用途，特别是果品工业中。果胶甲基酯酶是一种能催化能水解果胶生成甲醇和果胶酸的酶，国际酶委员会将它归类于果胶。然而在食品工业中，果胶酯酶用于制备低甲氧基果胶和果汁加工澄清等。果胶甲基酯酶是植物的细胞壁代谢过程当中的一个十分重要的酶，参与了植物许多生理的过程，是构成植物细胞壁的主要成分[1]。果胶甲基酯酶可以催化果胶主链脱甲酯化作用，产生羧基的基团，并且同时释放出氢离子和甲醇[1]。这样就会改变细胞壁周围环境的PH值，然而会影响其他的果胶分解酶，比如会影响果胶裂解酶的活性[4]。然而在香蕉和土豆中，发现了对果胶甲基酯酶的活性有抑制作用的成分，命名为果胶甲酯酶抑制剂，但是对细菌的果胶甲基酯酶并没有抑制的活性[7]。

果胶甲基酯酶在一百多年前已经被发现了，在高等植物中几乎都能发现果胶甲基酯酶的活性，然而在一些植物中致病的细菌和真菌都能够合成此酶。果胶甲基酯酶通常被编码为前蛋白原，含有前导序列，通常是由250个氨基酸组成[1]。前导序列对果胶甲基酯酶的生物学功能起到一系列的作用，对果胶甲基酯酶定位起到作用。果胶甲基酯酶的活性受到非常多的因素的影响，通常认为果胶甲基酯酶的活性主要受到果胶甲基化和细胞壁周围环境PH值的影响。然而，这只是一部分的影响因素，果胶甲基酯酶的活性调控还会存在其他的机理，有待发现。

然而在猕猴桃果实中发现了一对果胶甲酯酶有抑制作用的蛋白，这个抑制剂可以抑制许多植物中的果胶甲酯酶的活性[1]。但是对于细菌和真菌的果胶甲酯酶并没有活性。将不同植物来源的蔗糖酶抑制剂与果胶甲基酯酶抑制剂进行比较，发现这些蛋白的半胱氨酸残基位置相同。另外，在其他位置也存在一定的同源性[1]。这种研究的发现，在果蔬汁加工过程中也具有极大的应用潜力。

2。材料与方法

2。1实验材料

本研究所用的植物材料为陆地棉C312和野生型拟南芥Col-0。

2。2 实验试剂文献综述

2。2。1 栽培试剂

拟南芥栽培所用土壤：实验室所用植物营养土和蛭石，按照比例1：2来进行配比。

除草剂：basta除草剂配比。

2。2。2 RNA抽提和RT-PCR试剂

（1）DEPC水：吸出1ml放在1000ml双蒸馏水中配成1%DEPC水，放在1000ml容量瓶中静  置4小时备用。

（2）75%乙醇：用无水乙醇+DEPC水配，然后放-20℃保存。

（3）异丙醇：放入棕色瓶中。

（4）氯仿：放入棕色瓶中。

（5）电泳缓冲液。

 (6)琼脂糖。

 （7）上样缓冲液。

2。2。3 QRT-PCR试剂

SYBR Green试剂盒

H2O

特异引物

2。3实验仪器设备

（1）高压灭菌锅

（2）研钵

（3）小型高速离心机

（4）超低温冰箱

（5）恒温培养箱

（6）定量PCR仪

（7）纯水仪 亚洲棉司笃克氏棉及其体细胞杂种纤维发育调控差异表达基因的克隆及分析(3):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_87802.html