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1。3方法

1。3。1桦褐孔菌的静止培养

1。配制PDA液体培养基，准备50个三角烧瓶，每个瓶子中分装30ml培养液，再进行高压灭菌处理。

2。 每25瓶分为一组，实验组(a)假如22。5g蔗糖，并且加入2,5g化合物，同时加入伴生菌发酵液；而对照组(ck)则加入25g蔗糖，经高温灭菌后待用。

3。 在50瓶培养基在无菌环境下加入0。5ml打碎均匀的桦褐孔菌菌液。

4。 将接好菌的培养瓶放入保温箱中28℃培养。

5．每隔三天分别从对照组和实验组中各随机取样5瓶，分别做好标记为：a1、a2、a3、a4、a5（实验组）、ck1、ck2、ck3、ck4、ck5（对照组），并且还要准备一个空白对照组记为b。

1。3。2 桦褐孔菌的产量论文网

将菌体取出后，用滤纸吸干并充分挤干，放于天平中称取干重，并做好记录。

1。3。3 桦褐孔菌的PH

菌体取出后，用酸度计测量发酵液的pH值，并做好记录。

1。3。4 酶活性测定的方法

1。3。4。1淀粉酶活性测定（Amy酶）

        从实验组的发酵培养基中取0。5ml酶液，再从对照组的发酵培养基中取0。5ml酶液，分别依次加入到11支试管中，然后再向各支试管中，用移液枪加入2ml的先前配制好的0。1mol/L且pH为5。6的柠檬酸缓冲液（其中含有1%淀粉），充分摇晃均匀后将试管放入到水浴锅中，在锅中维持水浴状态30 min后将试管取出来，为了能钝化淀粉酶的活力，试管取出来后迅速向每个试管中加入1。5 mL 的DNS 试剂，从而终止反应。紧接着我们再将试管置于沸水中维持煮沸的状态10 min后，在显色反应结束后，取出后用移液管移取1。0ml的蒸馏水分别加到每支试管中，在确保溶液冷却之后充分振荡使溶液混匀。按照实验要求，在540nm的波长条件下，依次测量各试管中溶液的吸光度值并做好实验记录。本实验的空白对照组b是用蒸馏水代替酶液。 伴生真菌对静止培养中桦褐孔菌的生理生化指标影响(5):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_89244.html