1。3。4。6 丙二醛的含量的测定方法(MDA)

(1) 制备酶液:

分别从加入发酵液的实验组和对照组的固体的菌体中称取5g放置于研钵中，分别编为两组a和ck，分别向研钵中加入15ml的提取缓冲液，将菌体研磨充分后使它成为匀浆的状态，接下来，将已经研磨好的菌体分别转入到离心管中，要注意离心管之间配平的问题，按照实验要求，在4000r/min的离心速度的条件下，等到10min之后，准备好干净的试管，从离心管中取离心后的上清液，即为我们所需要的酶液。文献综述

（2）测定：

准备三支试管分别标为a，ck和b，其中向a和ck试管中加入50ul的酶液，然后加入蒸馏水使总体积为2ml（第三支试管b是作为空白对照组，直接加入2ml的蒸馏水），接下来，分别向这三支试管中加入2ml的硫代巴比妥酸溶液（它的浓度是0。6%）分别加入到试管中，充分混匀。将试管放入到水浴锅内，且将温度调到100°C，在锅中维持水浴状态，水浴过程中，用橡胶塞将试管轻轻塞住，以防止蒸发的太多。20min之后迅速取出进行冰浴冷却后，把冷却后的溶液，转移到干净的离心管中，要注意离心管之间配平的问题，按照实验要求，在4000r/min的离心速度的条件下，等到离心10min之后，准备好干净的试管，从离心管中取离心后的上清液，按照实验要求，在450nm、600nm还有532nm的波长条件下，用紫外分光光度计测量他们各自所对应的吸光度值。

（3）含量计算：

丙二醛的浓度可以由A532-A600=155000×C×L这个公式计算出来，再根据浓度能计算出来，菌体组织在单位重量内的丙二醛的含量（标为μmol/g g）。L为比色皿厚度为1cm。

为了能够去除由于蔗糖所造成的实验误差：

我们用丙二醛的浓度C（单位：μmol/L）=6。45×（A532-A600）-0。56×A450

这样我们能够直接计算出发酵培养中的丙二醛的具体浓度，再根据浓度能计算出来丙二醛的含量。

2 结果与分析

2。1 桦褐孔菌的产量

2。1。1 桦褐孔菌在培养瓶中的生长情况如下图

图1发酵液促进桦褐孔菌的生长

Fig。1 Fermentation promote the growth of Inonotus obliquus 

图2发酵液促进桦褐孔菌的生长

Fig。2 Fermentation promote the growth of Inonotus obliquus 

图3发酵液促进桦褐孔菌的生长

Fig。3 Fermentation promote the growth of Inonotus obliquus 

图4发酵液促进桦褐孔菌的生长

Fig。4 Fermentation promote the growth of Inonotus obliquus 

图5发酵液促进桦褐孔菌的生长来~自,优^尔-论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-

Fig。5 Fermentation promote the growth of Inonotus obliquus 

由图一可以看出,对照组中没有加入发酵液,而实验组中加入了发酵液,在发酵培养的第7d、第10d、第13d、第16d和第19d的不同时间段期间，图中明显可以看出，在桦褐孔菌不断培养的时间内，桦褐孔菌的生长产量也是在不断的增大，但是对照组的菌体生长较为缓慢，实验组桦褐孔菌的生长速度明显比对照组快。