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2．2．4 对所得含杂质光萼猪屎豆碱纯化结晶 7
2.3 提取成分的理化性质和结构表征 7
2．3．1 提取成分的理化性质 7
2．3．1 提取成分的结构表征 8
3 光萼猪屎豆碱体外抗肿瘤作用 10
3．1 材料与实验仪器 10
3．1．1 材料 10
3．1．2 细胞株及培养环境 10
3．1．3 实验仪器 10
3．1．4 受试药物 10
3．2 光萼猪屎豆碱对人胃癌细胞株MGC-803体外增殖的影响 10
3．2．1 试验方法 11
3．2．2 结果与讨论 11
3．3 光萼猪屎豆碱对人肝癌细胞株HepG-2体外增殖的影响 15
3．3．1 试验方法 15
3．3．2 结果与讨论 15
3．4 光萼猪屎豆碱对人乳腺癌细胞株MCF-7体外增殖的影响 18
3．4．1 试验方法 19
3．4．2 结果与讨论 19
结论 23
致谢 24
参考文献 25
附录A 光萼猪屎豆碱质谱图 26
附录B 光萼猪屎豆碱氢谱图 27
附录C 光萼猪屎豆碱碳谱图 28
1 绪论
1.1 猪屎豆的概述
1.1.1 猪屎豆的特点
猪屎豆是豆科(Leguminosae)蝶形花亚科(Papilionoideae)猪屎豆属(Crotalaria Linnaeus)植物，它是近几年被人们发现的，它的应用范围很广阔，是一种急需开发利用的植物资源，所以猪屎豆的经济价值很高。根据资料显示，其中很多种已经应用于临床，另外猪屎豆属的种子也在油田、医药及食品等行业被广泛应用。还有很多种猪屎豆属的植物茎皮可做绳子、捕鱼网及造纸的原料。有的可做绿肥，有改良土壤之效。因为猪屎豆属植物适宜在沙质土壤中生长，所以又是一种很好的保持水土的植物[1]。
大猪屎豆(Crotalaria assamica Benth.)属于豆科植物猪屎豆属(Crotalaria Lnn．)，它的全草或带根全草以及种子都可以入药。其苦、淡、性平，具有清热解毒、凉血止血和利水消肿等作用[2, 3]。研究表明，大猪屎豆中主要活性成分为光萼猪屎豆碱(usaramine)，从它的结构来看是属于吡咯里西啶生物碱类(PA)[4～7]。
1.1.2 猪屎豆属植物中的化学组成
研究表明，猪屎豆属植物中化学组成种类繁多，目前已知从猪屎豆属的植物中分离提取得到的化学组成主要有生物碱(alkaloids)、黄酮类(flavonoids)、糖(sugar)、多糖( polysaccharides)、糖苷(glycosides)、有机酸(organicacid)、甾体(steroids)等[8]。
1.1.3 猪屎豆中光萼猪屎豆碱
经过动物抗肿瘤实验，光萼猪屎豆碱（光萼野百合碱）具有抗肿瘤的作用，以前临床上用于鳞状上皮癌、宫颈癌和白血病等的治疗[9, 10]。但是因为很多吡咯里西啶生物碱类的化学成分具有肝毒性，所以这类生物碱和含有该类成分得中药的发掘与利用都受到了很大的约束[11]。
1.2 猪屎豆属植物的作用及价值
1.2.1 药用价值
猪屎豆属植物的生存能力极强，它具有很多特点，例如耐热、耐干旱、耐瘠薄的；即使在土壤肥力不好和条件很差的地区，都可以种植，该属植物还可以改善土壤，所以人工栽培前景很广阔。猪屎豆属植物在老百姓中间已经很多用于治疗疾病。经过详细调查， 确定其中有22 种该属植物有很大药用价值。猪屎豆属的植物种类非常多， 植物分布也十分广泛，为进一步深层次展开研究， 探索出药用成分的含量高、毒性很小的抗肿瘤成分的植物， 提供了大量的的宝贵的植物资源[12]。猪屎豆属植物中最多且最重要的含有吡咯烷类生物碱， 它的生物活性比较强，有祛风除湿，消肿止痛，补肾固精，清肝明目，抗肿瘤等作用，但当然，不同的该属植物所含的生物碱种类和所含量也不尽相同。可以作为药用的有猪屎豆，假地兰、野百合、大猪屎豆、吊裙草，大托叶猪屎豆这几种该属植物。