八角金盘属于五加科常绿灌木，除了具有作为绿化植物美化城市的作用，它的叶、根、皮都有一定药用价值。根皮既具有化痰止咳、活血化瘀、散风除湿的功效，还有一定的抗癌作用[3]。

在我市，女贞树作为绿化植物大量被栽种，每年的果实期，大量的女贞果任其掉落，未能很好的将其利用，造成了女贞果实的浪费。在我国传统医学中女贞果有滋补肝肾，乌发明目之功效。女贞果不仅含有氨基酸、微量元素，还含有三萜类化合物等多种对人体有益的活性物质[4]。文献综述

黄酮类化合物不仅具有抗肿瘤、抗炎镇痛、抗氧化自由基、保肝等活性，而且具有防治心血管疾病、止咳抗炎、降血脂、延缓衰老、增强机体免疫力、镇痛等多种功效[1]，在医学和营养学上也有较高的应用价值。三萜类化合物主要是齐墩果酸（OA）和熊果酸（UA）。齐墩果酸毒性低，在消炎、抑制血小板的凝集、降糖、降低血脂、保护肝、肾、抗艾滋病毒、增强免疫和免疫调节等方面有显著作用,特别是对恶性肿瘤化疗导致的免疫功能下降的恢复和对抗结核药物的肝损害的保护意义重大[5-7]。熊果酸存在于大量的天然植物中，因其具有多种生物学效应，而被作为原料广泛地用于医药和化妆品行业。熊果酸有镇静、抗菌、抗糖尿病和毒性小等特点，对正常小鼠巨噬细胞的吞噬功能有明显增强作用，其临床表现有显著，在恢复肝功能和保肝方面具有见效快、疗程短、效果稳定的特点[8]。

目前，已有对柿叶中黄酮的分离与鉴别的研究和报导，但还未见关于运用HPLC法对柿叶等植物中黄酮类化合物、齐墩果酸和熊果酸四种物质的同时测定方法研究的报导。本文对此做初步研究，以便为日后运用HPLC法同时测定其它样品中的黄酮类化合物、齐墩果酸和熊果酸提供更为全面的理论依据。综上所述，黄酮类化合物、齐墩果酸和熊果酸具有在药品、食品、保健品、化妆品等多领域开发研究利用的价值。

2  实验部分

2.1  仪器与试剂

Agilent1260高效液相色谱仪（美国Agilent公司），旋转蒸发器RE-3000（上海亚荣生化仪器厂），多用途恒温超声波提取机（上海比朗仪器有限公司），SHZ-D（Ⅲ）循环水式多用真空泵（巩义市科瑞仪器有限公司），LJG-18S冷冻干燥机（河南兄弟仪器设备有限公司），T-214电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司），500克摇摆式高速万能粉碎机，KQ-100VDB型三频数控超声波清洗器。

儿茶素标准样品、橙皮素标准样品、熊果酸标准样品、齐墩果酸标准样品（均购于贵州迪大生物科技有限责任公司）；95%乙醇（国药集团化学试剂有限公司），乙腈（色谱纯，国药集团化学试剂有限公司），乙酸铵（分析纯，上海实意化学试剂有限公司），甲醇（色谱纯，天津基准化学试剂有限公司)。

材料：柿叶购买于安徽省亳州市药店，八角金盘叶、八角金盘果和女贞果均于2015年1月摘于淮阴师范学院王营校区校园内，已标明的树上。

2.2  色谱条件

色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18（4.6×100㎜，3.5μm）；流动相为甲醇-乙腈-乙酸铵（55：27：18）；流速为0.6ml/min；柱温：25℃；进样量：10μL；检测波长：0-8分钟波长为280nm,8分钟后波长为210nm。

2.3  实验方法

2.3.1  标准样品溶液的配制及柿叶样品的提取

儿茶素标准样品的配制：准确称取0.0085g儿茶素标准样品，用甲醇（AR）充分溶解并定容于50mL容量瓶中，得浓度为0.1700mg/mL的儿茶素储备液，经0.45μm滤膜过滤后备用。

橙皮素标准样品的配制：准确称取0.0085g橙皮素标准样品，用甲醇（AR）充分溶解并定容于50mL容量瓶中，得浓度为0.1700mg/mL的橙皮素储备液，经0.45μm滤膜过滤后备用。