2。3。2 酰基供体与酰基受体物质的量比对大麦醇溶蛋白糖基化修饰反应的影响 7

      2。3。3 PH值对大麦醇溶蛋白糖基化修饰反应的影响 7

      2。3。4 TGase添加量对大麦醇溶蛋白糖基化修饰反应的影响 8

      2。3。5反应温度对大麦醇溶蛋白糖基化修饰反应的影响 8

      2。3。6反应时长对大麦醇溶蛋白糖基化修饰From优T尔K论M文L网wWw.YouERw.com 加QQ75201^8766 反应的影响 8

  2。4 SDS-PAGE确认大麦醇溶蛋白与氨基葡萄糖发生交联反应 8

  2。5 溶解性测定 9

3。 结论 9

致谢 10

参考文献 11

引言

大麦在世界粮食作物中的产量仅次于小麦、稻谷以及玉米，居于第四位，其年产量约6Mt[1]。大麦籽粒蛋白含量较多，依据Osborne溶解度分类法，可将大麦籽粒蛋白分为4类蛋白质，分别是清蛋白(Albumin)、球蛋白(Globulins)、醇溶蛋白(Hordein)和谷蛋白(Glutelin)[2]，其中醇溶蛋白是其主要组分之一，占35%-45%左右[3]。大麦醇溶蛋白氨基酸组成比较特别，含有较高含量的脯氨酸、谷氮酸和酰氨氮，但是其赖氨酸含量极低[4]，这造就了其特殊的性质，如具有良好的流变特性[5]、起泡性、持油性及乳化性[6]等。论文网

醇溶蛋白的应用有很多。早在20世纪，研究人员开发出的醇溶蛋白相关应用有：按钮、纤维、粘合剂、涂料等[7]。近几年更是开发出了诸如药物传递[8]、生物支架[9]等方面的应用。然而大麦醇溶蛋白不溶于水但溶于乙醇的特殊性质大大限制了有关应用开发的领域。此外有研究表明，大麦醇溶蛋白可由无还原剂的70%乙醇提取,也可用55%的异丙醇提取[10]。影响大麦醇溶蛋白提取率的要素有很多，诸如乙醇浓度、乙醇与大麦粉的比值即料液比、反应温度、提取所用时长等。不少研究人员对大麦醇溶蛋白提取的最优条件体系进行了探索，曹威等[11]探索出的大麦醇溶蛋白的提取条件中，最佳乙醇浓度为70%，最佳液料比为6:1(mL/g)，最佳反应温度为25℃、最佳反应时长为2。0h，在此反应体系下可得纯度为82。1%的大麦醇溶蛋白，其提取率为2。95%。 Cheng Wang等[6]探索出的大麦醇溶蛋白最佳提取条件与曹威等人的研究结果大致相同，但其实验结果显示出的最佳乙醇浓度为55%，反应温度为60℃，所得大麦醇溶蛋白纯度高达90%以上。

研究表明，糖蛋白具有良好的理化性质，而对蛋白质进行糖基化修饰可以明显使蛋白质的某些功能特性得到优化，如乳化能力、免疫原性、抑菌性、抗氧化性、溶解性等[12]。用糖基化修饰蛋白质指的是糖类物质与蛋白质发生交联反应，即糖以共价键的形式与蛋白质结合，从而得到修饰产物糖蛋白，由于糖类物质具有亲水性，故修饰产物兼具糖类物质的亲水特性以及蛋白质的功能特性。广泛采用的糖基化修饰食品蛋白质途径是美拉德反应，然而其有反应时间长、降低蛋白质营养价值以及食品安全等问题[13-15]。转谷氨酰胺酶（transglutaminase, TGase）可催化蛋白质与氨基糖发生交联反应[16]。用TGase催化蛋白质糖基化是近来开发的蛋白质改性途径，比起传统的美拉德反应具有反应速率快、不产生副反应、反应条件温和等优点[17]。壳寡糖又可称为低聚葡糖糖胺、低聚氨基葡萄糖，由2-氨基葡萄糖通过β-1、4糖苷键连接而成，含有部分的乙酞氨基葡萄糖残基，是一种碱性氨基寡糖[17]。寡糖有较多的亲水性羟基，分子量也较高，因此比起单糖，寡糖在参与蛋白质糖基化修饰方面有更好的前景。