该方法具有设备简单、操作方便、适用面广等优点,但也存在操作时间长,对不同成分的浸提速率及分辨率不高,重复过程多,效率低,能耗高等缺点。
(2)微波辅助法
微波提取是利用微波的穿透性能够透入基质内部形成热源,利用其加热的选择性,能够使细胞内各细胞器升压,细胞壁破裂,使目标成分从细胞中释放出来并溶解于溶剂中,近年来微波技术开始应用于中草药有效成分的提取,如Ganzler[9]从棉籽中提取棉籽糖,国内也有人将微波技术应用于甘草、黄麻、雪莲等有效成分的提取,但至今未见将微波和超声波技术用于提取甘草多糖的报道。
微波辅助法提取多糖得率最低,但微波能促进反应的高效性和强选择性,具有操作方便、省时、节能等特点,提取含量相对较高,同时微波辅助提取法所得到的产品副产品少,易提纯,微波加热还易使植物细胞壁破裂,能有效提高提取率。微波功率大,萃取温度高,导致多糖浸提速度加快,提取率增加,但温度过高会影响多糖的活性。利用微波法可以有效地提高多糖的提取率,但微波辅助萃取是否影响多糖的生理活性,有待进一步研究,而且这种方法目前尚属于实验室阶段,不能用到工业生产中。
(3)超声波法
超声波法提取多糖的得率较高,超声波法是应用超声波来强化提取多糖,通过空化、振荡等作用,促进细胞周围形成微流,从而提高细胞膜及细胞壁的通透性,是一种物理破碎过程。超声波师频率高于20kHz的机械波,它在媒质中传播时可产生空穴作用,空穴中产生的极大压力造成被破碎无在瞬间破碎,同时超声波产生的振动作用加强了破碎物的扩散及溶解。因此,在提取细胞内物质的过程中科用超声波进行细胞壁破壁,从而达到充分释放多糖,提高多糖提取量的作用。在国外,超声波提取法在中草药化学成分提取中应用比较早,Rose[10]等利用超声波从萝芙木属植物的根中提取生物碱,Demagglo[11]等从曼佗罗叶中提取曼佗罗碱。在国内,目前超声波提取法在中草药化学成分提取中应用比较多,在天麻、大黄等中草药有效成分的提取中均有报道。
超声波提取法具有时间短、效率高等特点,该法较热水提取法简便,因此超声波法仍是值得推广的一种提取方法。
(4)酶法
酶法提取多糖得率较低,木瓜蛋白酶是植物性蛋白水解酶,该酶可水解多糖溶液中的大部分游离蛋白质和部分结合蛋白质,使提取液中的大部分游离蛋白质和部分结合蛋白质[15],使提取液中只含有少量蛋白质,降低了它们与多糖的结合力,有利于多糖的浸出。
此法可浓缩工艺和简化脱蛋白操作,可达到提高提取率、缩短提取时间、减少能耗和有效保存多糖生物活性的目的,但是操作繁琐,时间较长。
(5)酶法—超声波协同萃取法
酶法—超声波协同萃取法提取沙棘多糖的多糖提取量较高,同时具有反应温度低、条件温和、不改变多糖链的结构,反应容易控制,基本不产生衍生物等优点,并且蛋白酶水解对氨基多糖的释放十分有效,但提取时间较长。
从上述介绍可以看出,各种方法各具优点和缺点,采用单一方面都难以得到高浓度、较纯净的多糖,但有的方法,如酶法与超声波法[13],它们具有互补性。在实际中,为获得高浓度的产品,常常在考虑成本基础上取长补短,利用各方面优点,将多种方法有机结合使用,这样可以大大提高产品纯度。
1.5 本课题的研究目的和意义
以往只注重从甘草中提取甘草酸和甘草黄酮,而忽略了多糖的重要活性,将含有大量多糖类物质的固形物作为废弃物扔掉.造成浪费。针对这种情况,本论文对不同原料(甘草超临界萃取物、提甘草黄酮后固形物、提甘草黄酮和甘草酸后的固形物、提甘草黄酮后固形物的超声提取物、甘草根茎原粉)的多糖含量进行了比较研究,并以超临界提取过甘草黄酮后的剩余固形物为原料对甘草多糖提取纯化工艺进行了深入而系统的研究,确定了一套新的甘草多糖提取纯化工艺。
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