(2) 辣木种子的预处理:选择饱满无皱缩的辣木种子,去掉纸质白翼与外壳,剥壳需额外小心,避免种仁损伤。
(3) 辣木种子的消毒灭菌:
○1将预处理过的辣木种子放入已灭菌通风后超净台中的已灭过菌的烧杯中,用75%酒精浸泡30s。
○2将75%酒精倒入废液缸内,向烧杯中倒入1%升汞消毒15min,在此期间用镊子搅拌,以促进材料与消毒液的充分接触。
○3倒出升汞,向烧杯中加入无菌水2-3min,重复4次,轻轻摇晃以清洗种子。
(4)接种:将已消毒的辣木种子分别放入已灭菌分装好的培养基中,每瓶培养基接1颗种子,每处理接种15颗种子。
(5)培养: 置培养室,23-25℃下,暗培养10天后,见光培养。
(6)统计数据:培养时间分别为11天,14天和17天的时候统计数据,分别统计污染率,萌发率以及苗高。
(7)重复3次试验。
1。2。2 不同浓度6-BA对辣木外植体增殖的影响
(1)配制6-BA浓度不同的辣木外植体增殖培养基
基本营养:MS,30g/L蔗糖,5g/L琼脂粉
1号培养基 0。25mg/L BA
2号培养基 0。 5mg/L BA
3号培养基 1。0mg/L BA
pH调至5。8,密封膜封口。
(2)用不同浓度KNO3对辣木种子萌发培养至17天后,可观察到辣木种子萌发且涨势茂盛。在已灭菌通风后超净台中,将辣木苗从培养瓶中移出,放置在垫有已灭菌过的滤纸上,用75%酒精消毒后的刀和镊子,切下辣木苗的顶芽与子叶节,两者都置于BA0。25mg/L, BA0。5mg/L, BA1。0mg/L培养基(除BA不同外,其它成分都为MS,6g/L琼脂粉,30g/L蔗糖)上分别培养,每瓶接种4株。子叶节先暗培养15天,后见光培养;顶芽直接见光培养。文献综述
(3)数据记录:培养20天、25天、30天,分别记录苗高,平均芽数。
(4)实验重复3次。
1。2。3 不同浓度IBA对辣木生根的影响
(1)配制IBA浓度不同的辣木外植体增殖培养基
基本营养:1/2MS,30g/L蔗糖,5g/L琼脂粉
1号培养基 0。1 mg/L PP333
2号培养基 0。25mg/L IBA+ 0。1 mg/L PP333
3号培养基 0。5mg/L IBA+ 0。1 mg/L PP333
pH调至5。8,密封膜封口。
(2) 在已灭菌通风后超净台中,将前面用不同6-BA诱导辣木子叶节增殖的辣木植株,从培养瓶中移出,放置在垫有已灭菌过的滤纸上,用75%酒精消毒后的刀和镊子,切下子叶节增殖出来的辣木芽,一芽为一株,接种到IBA浓度不同的生根培养基中,每瓶接种4株,见光培育。
(3)数据记录:培养15天,分别记录生根率,根数与根长。
(4)实验重复3次。