低温锻炼和水杨酸预处理对拔节期小麦抗寒性的影响(2)
有研究表明低温锻炼可以提高植物对更低温度的适应性[15]，耐寒性较强的沙冬青经过2℃的低温锻炼处理，其抗寒性更是显著的提高[16]，通过叶面喷施SA的方式，在低温胁迫过程中可以降低膜透性、MDA含量[17]，文持正常的细胞液环境，提高了植物对低温的适应性。但是对于低温锻炼和SA处理对小麦抗寒性影响及其生理机制还较少，需要进一步的研究。本研究以扬麦16为研究材料，通过盆栽试验研究低温锻炼和水杨酸预处理后拔节期小麦抗氧化系统及光合作用对低温胁迫的响应，以期明确低温锻炼和水杨酸对拔节期小麦抗寒性的影响。
1. 材料与方法
1.1 试验设计
盆栽试验于2016至2017年在南京农业大学牌楼试验基地进行。试验材料为冬小麦品种扬麦16号。试验用土属黄棕壤，含有机质 13.1 g/kg、全氮 1.1 g/kg、速效氮72.4mg/kg、速效磷41.9 mg/kg、速效钾146.2 mg/kg。称取7.5 Kg装入高22 cm，直径25 cm的盆中，为保证植株营养的需要，每盆施纯N 1 g、P2O5 0.36 g和K2O 0.9 g作为基肥，与土混匀后装盆，土壤经水沉实后播种。于三叶一心间苗，留苗7株／盆，于拔节期追施纯N 0.8 g。
低温锻炼和SA预处理：于七叶一心进行。低温锻炼和SA预处理时，将小麦植株分为三组，分别置于两个人工气候室中：一组为不锻炼不喷施处理、另一组为低温锻炼处理、最后一组为喷施SA处理。低温锻炼组人工气候箱的参数设置为温度昼夜4℃／2℃，对照组人工气候室的设置为15℃／10℃，光周期均为10 h，光照强度为400 μmol m-2 S-1。锻炼处理进行2天后结束。喷施SA的浓度为100 μΜ，早晚各喷施一次，共四次。
低温胁迫处理：将上述每组处理再分为两组分别置于两个人工气候室中：一组为对照，另一组进行低温胁迫处理，其中，低温胁迫处理温度第一天设定为2℃／0℃，第二天设定为2℃／-2℃，对照的昼夜温度为15℃／10℃，其余参数保持一致。
本试验共计形成了6个处理：空白对照 (CK)、低温对照 (F)、低温锻炼+无低温胁迫 (P)、低温锻炼+低温胁迫 (PF)、喷施SA+无低温胁迫 (SA)、喷施SA+低温胁迫 (SF)。
1.2 测定项目及方法
1.2.1 地上部干鲜重及株高
干鲜重：在各取样时期每处理取三盆苗，每盆取6株，进行鲜重的测定；105℃杀青30min后在65℃烘干至恒重，测定干重；
株高：开始处理前选取生长一致的植株（5株）进行标记，于各个处理时期进行测定。
1.2.2 光合及叶绿素荧光参数测定
光合参数测定：小麦全展顶一叶净光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）、胞间二氧化碳浓度（Ci）用便携式光合速率测定仪 LI-6400 进行测定（Li-Cor 公司，美国）。开放式气路光源叶室二氧化碳浓度为 380 μmol mol-1，通过内置设定光源设定有效辐射 （ PAR）为 1000 μmol m-2 s-1。
叶绿素荧光参数测定：用 CF Imager 叶绿素荧光成像系统（英国 Technologica 公司生产）测定荧光参数。测定之前对幼苗进行至少 20 min 暗适应，试验所用最大连续活化光为 2000 μmol m-2s-1，饱和脉冲光> 6000 µmol m-2 s-1 测定 PSⅡ的最大光化学效率（ Fv/Fm），选定整个叶面为 AOI（Area of Interest）计算各参数的平均值