摘要：近年来，环境中的重金属污染问题越来越严重。重金属在土壤中具有难降解、难迁移等特点，能够在生物链中不断富集积累，对人体产生毒害。微生物在修复重金属污染环境的过程中起着重要作用。本文从江苏省高邮市某电缆厂厂区和某炼锌厂的污泥中筛选得到一株对重金属Cu2+具有高抗性的菌株L-6和一株对重金属Zn2+有高抗性的菌株D-2。通过形态学观察和生理生化分析，并结合16S rDNA序列分析，将L-6鉴定菌株为根瘤菌属（Rhizobium sp。），D-2菌株为微杆菌属（Microbacterium sp。）。菌株L-6最适生长条件为30℃、pH 7。0，能够在Cu2+浓度800 mg·L-1的培养基生长。菌株D-2最适生长条件为30℃、pH 7。0，能够耐受Zn2+浓度达到3250 mg·L-1。 86092

毕业论文关键词：抗铜细菌；抗锌细菌；Rhizobium sp。L-6；Microbacterium sp。D-2

Isolation, Characteristics of Copper - Resistant Bacterium and Zinc - Resistant Bacterium

Abstract：In recent years, the problem of heavy metal pollution in the environment has become more and more serious。 Heavy metals in the soil is difficult to degrade, to migrate, and is easy to enrich in the biological chain accumulation, which causing the human body poisoning。 Microorganisms play an important role in the remediation of heavy metal pollution。 In this paper, a strain L-6 with high resistance to heavy metal Cu2+ and a strain D-2 with high resistance to heavy metal Zn2+ are isolated from the contaminated soil in Gaoyou city, Jiangsu Province。 Based on the analysis of their 16S rDNA sequence, we identify it as Rhizobium sp。 and D-2 as Microbacterium sp。 The optimum growth conditions of L-6 strain are temperature of 30℃, pH of 7。0。 According to the study, L-6 has high copper-resistance and maximum tolerable is 800 mg·L-1。 The optimum growth conditions of D-2 strain are temperature of 30℃, pH of 7。0 and the result shows that D-2 has high Zinc-resistance and maximum tolerable is 3250 mg·L-1。

Key words: Copper-resistant Bacterium；Zinc-resistant Bacterium；Rhizobium sp。L-6；Microbacterium sp。D-2

目  录

摘要 1

关键词 1

引言 1

1。材料与方法 2

1。1。供试土壤  2

1。2。培养基及试剂  2

1。3。主要仪器 2

1。4。重金属抗性菌株的筛选及纯化 3

1。5。菌株对Cu2+和Zn2+ 的耐受性验证 3

1。6。抗性菌株形态学与生理生化鉴定 3

1。7。抗性菌株生长条件试验 3

1。7。1。温度 3

1。7。2。初始pH 3

1。8。抗性菌株16s rDNA序列的系统发育学分析 3

1。8。1。16s rDNA的PCR扩增 3

1。8。2。扩增产物切胶回收4

1。8。3。酶连4

1。8。4。转化4

1。8。5。提取质粒4

1。8。6。测序与分析4

1。9。抗性菌株耐受性试验 4

2。结果与分析 5

2。1。抗铜菌株L-6的分离与鉴定 5

2。1。1。抗铜菌株L-6的分离5

2。1。2。抗铜菌株L-6生理生化特性 5

2。1。3。抗铜菌株L-6 16s rDNA序列的系统发育学分析 5

2。2。抗锌菌株D-2的分离与鉴定   6 

2。2。1。抗锌菌株D-2的分离6

2。2。2。抗锌菌株D-2生理生化特性7

2。2。3。抗锌菌株D-2 16s rDNA序列的系统发育学分析 7

2。3。抗性菌株的生长条件  8

2。3。1。温度8

2。3。2。初始pH  8

2。4。抗性菌株对重金属的耐受性试验  9

3。讨论  10

致谢  10

参考文献  11

抗铜细菌和抗锌细菌的筛选和特性研究

引言：

近年来，随着我国经济的发展，重金属污染问题也日益凸显。过度的工业活动使得重金属污染对人民健康产生巨大威胁，也为可持续发展带来了隐患。重金属是指汞、镍、铜等45种比重大于5的金属[1]。重金属污染主要具有难降解、积累性、富集性等特点，能够在生物链中不断富集积累，从而对动植物及人体产生毒害。重金属污染会降低土壤微生物的生物量、改变土壤酶活性及微生物群落等，导致农作物产量降低甚至绝收[2]。