在制片前，我们先制作鉴定线虫专用的载玻片。先利用载片恒温烘干机（60℃）将石蜡融化，把普通载玻片放在烘干机上，用模具在其中央拓印，而后冷却制成蜡圈（拓印时往往第二三张薄厚恰当，因此我们通常先拓在一废弃载玻片上，舍去一些多余的石蜡）。

在脱水完成后，用解剖针将小培养皿中含有线虫的甘油刮下（这一操作须在解剖镜下执行，避免小培养皿壁上残留线虫），放至蜡圈中，加盖玻片，再放在载片恒温烘干机（60℃）上使石蜡融化，待其冷却凝固后即制成装片。由于我们不是用解剖针挑取线虫，而是用移液枪吸取的，因此玻片中含有一定的杂质，为了方便观察，我们先往小培养皿上滴加纯甘油稀释，将一份样品根据杂质多少分成3~5个装片。在制作装片过程中，我们需要注意滴加在蜡圈中的甘油量，盖上盖玻片与蜡圈大小一致是最好的，但在不能保证的情况下，宁可滴加的少一点，虽然视野小，但至少保证没有虫子溢出。

2。5鉴定与摄像：

我们用Olympus BX41显微镜来对线虫进行鉴定，一般根据口腔形状，侧器的有无及其形状，口针的有无及其形状，牙齿的有无及其形状，交合刺及生殖附器的形态，和尾部的形态等特征来鉴别线虫的属类。并选择较为清晰的图像用Nikon DIGITAL SIGHT DS-U3成像系统进行显微摄像，留作样片。文献综述

2。6。数据处理

利用PRIMER5软件，计算秋季杭州湾潮滩湿地在不同生境下底栖线虫的群落生态指数。所用的生态指数如下：

属数（Genus number）：是指线虫群落中，线虫属类的数目，是一种最简单的多样性测定方法。

丰富度指数（richness index）: d=（S-1）/logeN；

多样性指数（Shannon index）：H’=-∑PilnPi ,Pi为第i个分类单元中个体占线虫总个体数的比例；

均匀度指数（Evenness index）：J=H/lnS，其中H为多样性指数，S为鉴定分类单元的数目；

优势度指数（Dominance）：λ=∑Pi2[11]。

通过以上五个指数来描述潮滩湿地高程梯度和生境差异对底栖线虫物种组成和多样性的影响。

    并采用Statistica统计软件对线虫群落特征进行，以检验不同生境对线虫密度、线虫多样性及其群落结构的影响, 后续比较采用了Tuckey多重比较检验。

３。结果与分析

3。1线虫属的组成

本研究共记录杭州湾滩涂湿地线虫32属，隶属于2纲6目22科，现将其属别详列如下。各属的特征简述及摄影图见附录。