1 材料与方法

1。1 材料

1。1。1 实验材料

亚洲地区56份大麦样品（绿色健康叶片）。

1。1。2实验试剂及制备方法

 异戊醇、氯仿、75%酒精、琼脂糖、TBE、核酸染料、loading buffer、蒸馏水。

①CATB的制备：按氯仿：异戊醇＝24：1配制

②TBE的制备：称取54gTris碱，27。5g硼酸，溶于8000mL蒸馏水中，再加入20mL0。5M EDTA（pH8。0)，充分溶解后，用蒸馏水定容至1L，常温储存。。

③电泳液制备：TBE:H2O 1:10 ，取400mLTBE溶液于4L蒸馏水中混匀，常温贮存。

1。1。3实验仪器

移液枪，微波炉，离心管，离心机，96微孔板，天平，锥形瓶，药勺等。

1。2实验方法

1。2。1样品的前处理

亚洲地区56份大麦样品(叶片)作为研究对象，分别编号装袋放置阴凉通风处保存备用。

1。2。2 基因组DNA的提取

   取大麦苗期植株幼嫩，绿色健康的叶片，并用CTAB方法快速提取DNA基因。

①选取大麦植株新鲜绿色的叶片放入研钵中，加入CTAB（氯仿：异戊醇＝24：1）750μL，快速将叶片研磨成糊状，上下剧烈摇一下，混匀并装入离心管中。研钵要放在液氮上，防止DNA变性。

②混合后的离心管置入65℃水浴锅槽中（40-45min)。文献综述

③从水浴锅中取出离心管，再加500μL氯仿于离心管中剧烈摇匀，静置5-10min后在转速为12000rp 生物离心机中离心8min 后，取上清液放到另一支灭菌过的离心管中。 再加入等体积（500μL）异丙醇，颠倒多次（温柔），放置4℃半个小时。

④12000rp 离心6min弃上清液，用75%酒精洗涤，再次离心后干燥DNA。

⑤加150μL dd H2O溶解DNA，。

⑥将提取出来的56份少量大麦DNA，进行琼脂糖凝胶电泳和分光光度计检测，其质量及浓度符合实验要求后，放置于4℃贮存。