2。5。2植株抽薹时间和相应莲座叶数量统计 8

2。5。3植株开花时间统计 8

2。5。4其他表型检测 8

3。 实验结果 8

3。1 转基因植株的获取及验证 8

3。1。1转基因拟南芥的获取 8

3。1。2转基因植株的CsSPL9基因表达验证 9

3。2 黄瓜CsSPL9基因异源表达影响拟南芥主根生长 9

3。3 黄瓜CsSPL9基因异源表达影响拟南芥抽薹时间 10

3。4 黄瓜CsSPL9的异源表达不影响拟南芥抽薹时莲座叶数量 11

3。5 黄瓜CsSPL9的异源表达影响拟南芥开花时间 11

3。6 其它表型检测比较 12

4。 总结与讨论 13

1。 引言

植物中有一类特有的转录因子SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein like)。在拟南芥等模式植物上的研究发现，SPL对花和果实的发育、植株形态建成、孢子发生、胁迫应答以及激素信号转导等多种生理生化过程都有一定的作用。

目前国内外关于SPL基因在不同植物中的研究有：Shikata发现SPL对水稻花序形态建成的影响，陈晓博研究番茄SPL基因对花柄离区发育的影响，宋长年等研究SPL基因在枳的不同组织中的表达特性和功能，赵晓初等对草莓SPL基因在不同生长时期的表达水平的研究，还有Wang JW研究SPL基因对拟南芥开花途径的调控。但尚未有关于黄瓜中SPL相关基因的克隆和这些基因参与黄瓜生长发育调控和性别分化的相关报导。黄瓜是一种重要的的经济作物，是典型的雌雄同株异花授粉植物，可作为研究性别决定、核质互作等生理机制的理想模式植物，近年来已成为了植物分子生物学研究的一种好材料。

基于模式植物拟南芥和金鱼草的研究而提出的花发育ABC模型，较好地解释了被子植物花发育的过程，极大地推动了植物花发育的研究。但是花和果实的发育在以黄瓜为代表的雌雄异花同株的物种上并没有太多探索。研究发现多个位点上的基因可能影响植株性别分化。在我们前期的研究中通过序列分析发现黄瓜中有14条SPL预测序列，以“津研4号”野生型黄瓜的雌雄花芽为材料，初步的定量PCR结果表明其中CsSPL9基因在在雌花芽中积累量较高，很可能参与了黄瓜性别分化调控。来自优W尔Y论W文C网WWw.YoueRw.com 加QQ7520,18766

因此本研究利用模式植物拟南芥作为研究材料，考察黄瓜CsSPL9基因对拟南芥生长发育的影响，明确CsSPL9基因对拟南芥生长发育的影响，并为进一步揭示其调控机制提供新的数据和参考。

2。 材料与方法

2。1 材料

实验材料：Columbia-0生态型拟南芥（Arabidopsis thaliana），即野生型拟南芥，于光照培养箱内进行培养，培养温度21 ℃，光周期均为长日照16 / 8 h，湿度70％。

2。2 主要试剂和仪器

主要试剂：Trizol、逆转录酶、割胶回收试剂盒、抗生素、琼脂糖、MS培养基。