麦秸还田和水分管理对稻田土壤微生物特征的影响(3)
1.3.4氯仿熏蒸法
在25℃的室温下将土样封存7天左右，然后取6份之前处理过的土样放入烧杯中，将其中 3 份置于底部有少量 NaOH、200m L 水和去乙醇氯仿的真空干燥器中，将干燥器抽成真空使氯仿沸腾3~5分钟，然后，将装置置于25℃黑暗避光环境中，熏蒸土壤24h再将装置抽成真空，使氯仿完全蒸发。将熏蒸好的土壤转移到200mL提取瓶中，加入 0.5 mol/L K2SO4浸提液（水∶土质量比为 4∶1）。另外 3 份做未熏蒸空白试验，每份重复 3 次，分别测定浸提液中的有机碳和全氮含量。其中浸提液中的可溶性有机碳采用总有机碳分析仪（Phoenix 8000，美国）测定，由熏蒸与未熏蒸土样有机碳的差值除以转换系数，计算得到微生物量碳。浸提液中土壤可溶性全氮采用碱性过硫酸钾氧化法测定，浸提液中无机氮采用流动分析仪测定，土壤可溶性有机氮是可溶性全氮和无机氮的差值。熏蒸与未熏蒸土样的全氮的差值除以转换系数，计算得到微生物量氮。微生物量碳、氮的转换系数为 0.45。土壤的有机质、全氮、全磷、有效磷、速效钾、NO3--N、NH4+-N、PH值采用常规的土壤农化分析方法测定。