1。2  植物组织培养 来自优I尔Q论T文D网WWw.YoueRw.com 加QQ7520~18766

现今全球的生物技术蓬勃发展。在农业、工业、医药业、环保以及能源等领域都已显示出其极强的应用生产潜力。而生物技术重要的手段就有植物组织培养技术，目前已成功应用于各个学科领域，例如植物生理学、生物化学和遗传学等学科的研究都较为透彻[2]，因此其作为进行生物研究的手段、技术不仅应用于很多行业，并且能造福整个社会。经过了无数代科研人员的不懈努力，植物细胞离体培养技术日臻完善，自上世纪中期起，植物组织培养技术发展十分迅猛。通过植物组织培养技术，可以量产出人们需要的具有相关特性的玉米新品种，并进一步得到相关附属产物；经离体培养后的细胞，通过融合打破种族界限，克服了远缘杂交的不亲和性，在改良种性和培育新品种植物方面还存在很多的发展空间。

G。。Haberlandt是第一个提出细胞全能性理论的研究人员，他的论点为：高等植物的组织器官具备持续分割成单个细胞的能力。意味着特定环境下，植物体细胞具备持续分裂并繁殖直至发育为完整植株的能力[3]。至二十世纪四十年代，White在对烟草实行愈伤组织培养过程中，发现形成了一个芽，因此使哈勃的观点得到验证。多年以来，许多科研人员在植物组织培养这条路上前赴后继，技术渐渐成熟，所取得的成果给全世界的社会经济带来了极大的效益。

据前人研究，对“植物组织培养技术”的概念进行了界定：植物组织培养技术是将植物细胞，原生质体等创造适宜的培养条件来诱导植物发生愈伤组织或芽等等的器官，有的则具备长成完整植株的能力一切操作需在无菌环境下进行。可选用的植物细胞、胚胎、组织器官等有很多，如茎尖、种子、花、叶等等；幼胚或者成熟胚。

配置培养基首先需配置基本培养基，基本培养及一般都含有植物组织培养所需的各种营养物质，常用的基本培养基有MS、N6等。

1。3  玉米组织培养研究进展

玉米通过异花授粉进行遗传，雌雄同株，变异多样，有甜玉米，糯玉米等等区分，且是我们日常生活中必不可少的粮食，不仅耐储存，还不易变质。也因此，研究转基因玉米，无论是基于国情，还是从科研技术方面考虑，都是势在必行的。二十世纪中期，Larue选用甜玉米胚乳诱导愈伤组织首次取得成功，虽未得到再生植株，但这次试验为玉米组织培养历史开启了新局面。时至今日，可从玉米的幼胚、成熟胚、花药、叶片等不同类型的外植体中，诱导愈伤组织，且都成功实现植株再生。

1。3。1 玉米幼胚论文网

幼胚是目前为止玉米组织培养中应用最多的外植体。不仅可以诱导形成胚性愈伤组织，还可直接用作受体材料。其优势在于方便研究人员取材并且操作相对简单，诱导率也较高。二十世纪七十年代，Phillips和Green首次使用玉米幼胚诱导并成功实现植株再生，其他学者也陆续使用玉米幼胚诱导愈伤组织并获得完整植株[4]。1996年，Ishida等[5]利用农杆菌介导法来转化自交系A188的玉米幼胚，并成功地到转基因植株。2002年，Frame等[6]使用同样的方法将gus基因转入Hi-Ⅱ材料中，再次成功获得玉米转基因植株。从那以后，玉米玉米幼胚就经常被作为受体材料进行遗传转化研究。

作为常用的转基因玉米受体，利用玉米幼胚获取再生植株与利用愈伤组织获取再生植株是的过程及原理是相似的[7]，除了一点不同：玉米幼胚首先进行转化过程，接着在后期继代筛选过程中形成愈伤组织，然后分化成苗；愈伤组织则先进行诱导，再转化，在筛选过程中逐渐形成新的有抗性的愈伤组织，最后分化成苗，两者所使用的培养及配方通常别无二致。授粉9-12天后才能获取玉米幼胚，因此用幼胚做受体，难免会被季节、温度和天气等外部环境因素影响；与此不同的是，经诱导形成的愈伤组织可在培养基上培养，不受外部环境因素的制约。据玉米幼胚作为受体材料的过程可知：相比较而言，玉米幼胚从侵染知道成功获取转基因再生植株的时间比使用愈伤组织进行实验要短得多。然而，在合适的温室条件作为配套设施下，也可常年获得玉米幼胚，不用再受季节因素的限制。