球囊霉素对土壤中多环芳烃吸附的影响(2)
多环芳烃(PAHs)有着“三致”效应（即致畸性、致癌性和致突变性），是持久性有机污染物中一种较典型的物质，地表水、土壤以及沉积物中均有检出[6]。由于多环芳烃(PAHs)具有较大的辛醇-水分配系数(Kow)，因而能在环境中长时间停留，且不易被分解。多环芳烃存在在水体中的形式主要分为三类：溶解于水；呈乳化状态以及吸附于悬浮性固体颗粒物(或沉积物)上[7]。一系列关于水环境中PAHs的研究证明，沉积物、活性炭、腐殖质及悬浮颗粒物均对PAHs有着极强的结合能力[8]。目前，多环芳烃(PAHs)在土壤环境中的迁移、转化以及对污染土壤的修复已引起众多学者的关注。
多环芳烃（PAHs）类化合物的一个典型代表物是菲，一般来说，它在受污染土壤中被检测出的浓度比较大。因此，本文以菲为多环芳烃（PAHs）代表物，供试为从土壤中提取的球囊霉素，拟研究球囊霉素对土壤吸附菲的影响，并比较易提取球囊霉素与总球囊霉素，尝试着能够揭示一些球囊霉素与土壤里的有机污染物多环芳烃的作用机制。
1材料与方法
1.1 供试材料
试剂：菲（Phenanthrene）购于Aldrich chemical Co.，其纯度大于98%，相对分子质量178.23g•mol-1，25℃条件下其在纯水中的溶解度为1.18mg•L-1，辛醇-水分配系数(logKow)4.46 L•kg-1。甲醇为色谱纯。
主要仪器有:卢 湘仪 高 速 冷 冻 离 心 机、恒 温 振 荡 器、SHIMDZU紫 外 分 光 光 度 计、 申 安 灭 菌 锅、高 效 液 相 色 谱 仪 (L C- 20 AT)等。
1.1.1供试土样
红壤、黑土以及黄棕壤分别作为本次试验的供试土壤，都是采自0-20cm的耕作层土壤。土壤采集完后，对其进行风干，磨碎后过优尔十目筛，备用。（土壤基本性质详见表1-1）。
表1-1 供试土壤基本性质
Table 1-1 Fundamental properties of tested soils
土 壤
Soil 采集地
Location pH值
pH value 有机碳含量(g•kg-1)
Organic carbon
红 壤 鹰潭 4.64 3.55
黄棕壤 南京 7.25 6.28
黑 土 哈尔滨 6.05 13.99
1.1.2球囊霉素
根据一开始用于从土 壤里提 取出球 囊霉 素的办法，球囊霉素可以分成四类，分别是：易 提 取 球 囊 霉 素、总 球 囊 霉 素、免 疫 反 应 球 囊 霉 素以及免 疫 反 应 易 提 取 球 囊 霉 素[3]。但是深入发掘后，发觉使用这种方式提取得到的球囊霉素不是AMF的专性分泌物，还不能够被认定为真正的球囊霉素。基于此，Rillig等[3]建议使用GRSP的新术语:球囊霉素相关土壤蛋白，即可以将球囊霉素分为BRSP（Bradford-reactive soil protein）、IRSP（Immunoreactive soil protein）、EE-BRSP（easily extractable BRSP）和EE-IRSP（easily extracted immunoreactive soil protein）四种，以不同的测量方法来定义球 囊 霉 素 相 关 土 壤 蛋 白（glomalin related soil protein，GRSP）。（表1-2）
球 囊 霉 素 相 关 土壤 蛋白（glomalin related soil protein）来源于南京紫金山灌木丛土壤。取一定量的土壤，按照固液比1:8加入pH 7.0、20mmol•L-1的柠檬酸钠溶液，于121℃、103Kpa的条件下提取30min，离心得到上清液透析后所得即为易提取球囊霉素（Easily Extractable Glomalin related soil protein，EE-GRSP）；总球囊霉素（Total Glomalin related soil protein，T-GRSP）用pH 8.0、50mmol•L-1的柠檬酸钠溶液提取，时间为一小时，循环至上清液无明显颜色后，收集上清液透析。球囊霉素需保存在4℃的环境中，采用考马斯亮蓝法（Bradford）来测量其浓度。