不同光照对多脉青冈幼苗生长和生理的影响(4)
（2）含水量测定
植物组织的含水量是反映植物组织水分生理状况的重要指标其直接影响植物的生长、气孔状况，光合功能及作物产量。植物组织含水量的表示方法常以鲜重、干重、相对含水量(或称饱和含水量)来表示。其中相对含水量可作为比较植物保水能力及推算需水程度的指。分别测量植物组织的鲜重Wf，干重Wd，饱和鲜重Wt，依据以下公式可以分别算出植物组织的鲜重含水量。
随机从每组取出3片，选取1~2片叶片用电子天平称量样品鲜重，后放置于烘箱中85℃烘干，等水分完全蒸发后称量样品干重，减少的质量/鲜重，计算出含水量。
（3）比叶重测定
比叶重(Specific Leaf Weight, SLW）是指单位叶面积的叶片重量（干重或鲜重），不过通常用干重来表示。是衡量叶片光合作用性能的一个参数。其倒数称为比叶面积(Specific Leaf Area, SLA)。它与叶片的光合作用，叶面积指数，叶片的发育相联系。
在同一个体或群落内显示受光越弱而比叶面积（cm2/g）越大的倾向，一般作为表示叶遮荫度的指数而使用。但在同一叶片，则显有随着叶龄的增长而减少的倾向。测量含水量的同时用便携式叶面积测定仪测量所取样品的叶片面积，后记录下样品干重数据，干重/叶片面积，取得比叶重数据。
（4）叶绿素含量测定
分光光度法：利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。
仪器：分光光度计、电子顶载天平(感量0．01 g)、研钵、棕色容量瓶、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管。
取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)，擦净组织表面污物，去除中脉剪碎。
称取剪碎的新鲜样品2 g，放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及95％乙醇，研成均浆，再加乙醇10 ml，继续研磨至组织变白。静置3～5 min。
③、取滤纸1张置于漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗，滤液流至100 ml 棕色容量瓶中；用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。
④、用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至100 ml，摇匀。
⑤、取叶绿体色素提取液在波长663 nm、645 nm下测定吸光度，以95％乙醇为空白对照。
按照实验原理中提供的经验公式，分别计算植物材料中叶绿素A、B和总叶绿素A的含量。
（5）气孔密度测定
首先选择市售的不含色彩的透明指甲油．利于镜检材料透光。
其次选取合适的植物叶片将指甲油均匀涂抹于取材部位上，使其自然晾干3-8 min(受光照、风等影响，晾干所需时间不一)，待指甲油涂抹层接端稍稍与叶片出现离口时，用镊子夹住离口处撕下已干的指甲油涂抹层将指甲油涂抹层与叶片接触的面展在滴有均匀甘油液层中，盖上盖玻片，用解剖针的钝端或手指轻压盖玻片，可使有气孔的指甲油涂抹层平展在甘油液层。并将气泡挤压出盖玻片。滤纸吸干周围甘油液[ 11]。气孔的临时装片即成。最后使用显微镜拍下。
2.3.2叶绿素荧光仪相关测定
光响应曲线测定
所有的叶绿素荧光参数的测量都用脉冲调制式叶绿素荧光仪 PAM -2500( Walz GmbH，EFFeltrich，Germany)完成。
按照A-B-C依次顺序，每次每组测试6盆，每盆选取1~2片叶子罩上避光袋，夹上特质感应器，通过电脑进行ETR(电子传递速率)、I K(最小饱和光强)、PAR（光合有效辐射）等数据的测定，并取得样本曲线进行对比。10月、11月、12月分别测定一次，观察其曲线变化并拍照记录，用 Excel 2003 软件对数据进行计算和作图。