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饲料高铜对大肠杆菌blaCTX-M基因在大鼠肠道内转移的影响(3)
1 材料与方法
1.1 菌株来源
构建灌喂接合子菌株的blaCTX-M-1阳性供体菌为本实验室保存的大鼠粪源大肠杆菌分离株;受体菌为大肠埃希氏菌EC600(耐利福平),由香港理工大学深圳研究院惠赠质控大肠埃希氏菌株(ATCC 25922)(药敏试验用),购于广东微生物菌种保藏中心。
1.2 试剂和仪器
主要试剂:麦康凯琼脂(MacConkey Agar,MAC),营养琼脂(Nutrient Agar, NA),营养肉汤(Nutrient Broth,NB),均购于北京奥博星生物技术有限公司。LB琼脂(Laked blood Agar),LB肉汤(Laked blood Broth),MH琼脂(Mueller-Hinton Agar, MHA),MH肉汤(Mueller-Hinton Broth, MHB),均购买于青岛海博生物技术有限公司。盐酸头孢噻呋(艾呼克)购于西班牙海博莱生物大药厂。五水硫酸铜(CuSO4•5H2O)购于上海国药集团。萘啶酮酸、头孢噻呋钠、头孢噻肟钠、盐酸环丙沙星,均购于大连美仑生物技术有限公司。氨苄西林、氟苯尼考均购于南京龙斌生物科技有限公司。盐酸四环素、硫酸庆大霉素均购于生工生物(上海)股份有限公司。
主要仪器:微量移液器(Eppendorf,德国),高压灭菌锅(致微仪器有限公司),超净工作台,恒温震荡培养箱(Crystal,美国),隔水恒温培养箱(BINDER,德国),超微量分光光度计NanoDrop2000(Thermo scentific,美国),PCR扩增仪(Applied biosystems,美国),电泳仪(北京市优尔一仪器厂),凝胶成像分析系统(Bio-Rad,美国)。
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