稻田天敌拟环纹豹蛛负幼行为研究(2)
1 材料与方法
1.1 供试蜘蛛
实验所用的拟环纹豹蛛于2016年6月底采集自我校江浦农场稻田中靠近水边的田埂或荒地上，并于实验室内放置在大塑料杯中单独饲养。大塑料杯直径9.5cm、高17.5cm，杯中装入一定量的土，土上覆盖一层蛭石，浇适量的水并种入水稻苗，保证水稻的充分生长，杯口用布封住。饲养温度控制在27±2℃，湿度80%，光周期为16L:8D，每周喂食两次，每次喂食投放15头褐飞虱。
1.2 负幼行为的初步观察
1.2.1 性别和发育时期对负幼行为的影响
本实验分别选取成年雌蛛、成年雄蛛、幼年雌蛛和幼年雄蛛各3头，将单头供试蜘蛛和15头刚从卵袋（来源为其他雌蛛）孵出的幼蛛同时放置在一个直径5.5cm、高6.5cm的无盖透明的塑料圆柱容器中，不放任何食物。16h后统计幼蛛存活数，以及雌蛛腹部背面的幼蛛数（即负幼数）。本试验以产生幼蛛的母体雌蛛作为对照（CK）。
1.2.2 雌蛛不同生理时期对负幼行为的影响
拟环纹豹蛛的成蛛期较长，且雌蛛可以一次交配后多次产卵，因此本实验根据雌蛛所处的生理时期不同，将其分为4组，分别为：a-性成熟但从未交配过的雌蛛；b-交配但未产卵的雌蛛；c-初次产卵并携带卵袋的雌蛛；d-产生过负幼行为并再次携带卵袋的雌蛛。分别将单头供试蜘蛛和15头刚从卵袋孵出的幼蛛同时放置在一个直径5.5cm、高6.5cm的无盖透明的塑料圆柱容器中，不放任何食物。16h后统计幼蛛存活数，以及雌蛛负幼数。本试验以产生幼蛛的母体雌蛛作为对照（CK）。
1.3 雌蛛负幼行为的周期性变化分析
本实验结合已有的文献报道[5]和室内实际条件，将雌蛛的生理时期划分为九个阶段，分别为：
A-雌蛛交配后3-5天；B-雌蛛第一次携卵开始0-5天；C-雌蛛第一次携卵开始10-15天；D-雌蛛负幼期；E-幼蛛完全独立后3-5天；F-雌蛛第二次携卵0-5天；G-雌蛛第二次携卵开始5-10天；H-雌蛛第二次负幼期；I-幼蛛第二次完全独立后3-5天。
分别将处于不同生理阶段的单头供试雌蛛和15头从卵囊中孵出的幼蛛同时放置在一个直径5.5cm、高6.5cm的无盖透明的塑料圆柱容器中，用单反相机连续拍摄30分钟，记录雌蛛和幼蛛的行为，并记录雌蛛捕食幼蛛数和负幼数。每个阶段选取供试蜘蛛10头。
1.4 数据分析
根据记录分别计算幼蛛的死亡率（公式1-1）、负幼率（公式1-2），及其平均值。利用GraphPad Prism 6软件绘制雌蛛负幼行为的周期曲线。
死亡率=（总数-存活数）/总数 公式1-1
负幼率=负幼数/存活数 公式1-2
2 结果与分析
2.1 负幼行为的初步观察
2.1.1 性别和发育时期对负幼行为的影响
本实验分别选取雌成蛛、雌幼蛛、雄成蛛、和雄幼蛛，观察了性别和发育时期对负幼行为的影响，结果见图1
图1 不同性别和发育时期豹蛛捕食率（左）与负幼率（右）
注：横坐标表示雌蛛的发育历期，纵坐标表示负幼率（捕食率），F-A表示雌成蛛，F-J表示雌幼蛛，M-A表示雄成蛛，M-J表示雄幼蛛，柱状图表示负幼率平均值±标准差，一个点代表一次重复。
根据图1的结果可以得出以下的初步结论：
1）根据CK组和雌性成蛛的数据，负幼率高而死亡率很低说明拟环纹豹蛛雌蛛确实具有负幼行为。
2）幼蛛和成年雄蛛没有这种负幼行为并且会捕食从卵袋孵出的幼蛛。