草莓DELLA蛋白的分析与克隆鉴定(2)
作为重要的植物生长调节剂，GA的作用机理在拟南芥、水稻等模式植物中已经研究的比较清楚，目前许多GA 合成与信号传导通路中的关键因子均已被分离鉴定。其中包括GA 合成途径的关键酶GA13oxidase ，GA20 oxidase ，GA3 oxidase 和GA2 oxidase ，GA 受体GID1(GIBBERELLIN-INSENSITIVEDWARF1)，DELLA 蛋白以及F-box 蛋白SLY1/GID2 等。
作为GA信号传导途径中的重要调控因子，DELLA蛋白在GA信号通路中起到承上启下的关键作用。是GA信号传导过程中的关键负调控因子，在GA信号传导过程中发挥阻遏作用，几乎抑制所有依赖GA的植物生长过程。它的积累会阻遏植物生长，其突变体的典型特征为植株矮化、迟花以及叶片深绿色[2]。
目前，已经在多种植物中鉴定并克隆到了DELLA 蛋白，拟南芥基因组有5个编码 DELLA 蛋白的基因，它们分别是：RGA(REPRESSOR of GA1-3)、GAI ( GIBBERELLIN IN-SENSITIVE ) 、RGL1 ( RGA Like1 ) 、RGL2 和 RGL3 [3]。它们均定位在细胞核，功能上冗余，但仍存在部分差异，RGA 与GAI 抑制植物的营养生长和诱导成花，RGL2 抑制种子萌发，RGA、RGL1、RGL2 三者共同调控花序发育而RGL3 则与植物对环境胁迫的适应有关[4]。研究还发现DELLA蛋白除了调控植物株型外还能够调控花青苷的合成，拟南芥中DELLA蛋白能够促进花青苷的合成。
DELLA蛋白属于植物特异的GRAS家族成员，不同植物中发现的DELLA蛋白在结构上均高度保守，在其蛋白序列的N端具有保守的DELLA结构域（包括DELLA 和VHYNP 两个酸性基序），其C端则为具有转录调节功能的GRAS结构域，在这一结构域中同样含有一些保守的基序，如LHRI，LHRII，VHIID, PFYRE 和SAW [5]。当GA受体GID1与有生物活性的GA结合后导致GID1改变构象，通过N端与DELLA蛋白的DELLA结构域结合，形成GA-GID1-DELLA复合体，DELLA结构域对复合体的形成是必需的，缺失掉结构域的DELLA蛋白不能与GID1相互作用，即使存在有活性的GA也不能形成复合体[6,7]。随后，GA-GID1复合体促进DELLA蛋白同SCFGID2/SLY1E3连接酶蛋白复合体特异地发生亲和反应，并最终通过26S蛋白酶体降解DELLA蛋白，从而解除DELLA蛋白的阻遏作用，完成赤霉素信号反应[8]。
作为GA信号传导途径中的关键负调控因子，一直以来，DELLA蛋白都是植物激素信号通路的研究热点之一。由于定位于细胞核而且能够调控其它基因的表达，以前一直认为DELLA蛋白是一类转录因子，但在DELLA蛋白的序列中并不含有DNA结合域，染色质免疫共沉淀(ChIP)实验也表明DELLA富集DNA的能力并不强。因此，人们推测DELLA可能与其它转录因子结合而调控下游基因的表达，2008年Feng和Lucas等人发现，DELLA蛋白RGA通过与光敏色素作用因子(phytochrome-interactingfactors，PIFs)PIF3/PIF4的互作调控拟南芥下胚轴的生长[9,10]。2013年Bai等人进一步研究发现，在调控拟南芥下胚轴伸长反应中还需要油菜素内酯(Brassinolide，BR)信号通路中的关键基因BZR1的参与，表明植物能够将BR，光信号与GA信号通路整合在一起调控植物的生长[11]。同样的调控方式还在GA调控茉莉酸(jasmonic acid，JA)信号反应和促进植物开花过程中被发现；拟南芥DELLA 蛋白结合JA信号途径中的转录抑制因子JAZ1从而释放MYC2，激活依赖于MYC2的下游JA响应基因的表达，而当GA存在时，DELLAs 被降解，JAZs 与MYC2 结合，抑制MYC2 下游JA 响应基因的表达[12]。
2012年Yu 等人发现，拟南芥DELLA 蛋白RGA 能够与SBP 家族的转录因子SPL9互作，形成异源二聚体阻止SPL9 与DNA 结合，从而抑制了下游开花相关基因的表达[13]。之前也有研究报道，植物体内DELLA 蛋白还受生长素，乙烯，细胞分裂素，脱落酸等信号途径中的相关蛋白调控[14]。以上研究表明各种激素对生长发育的调控并不是孤立的，不同激素之间存在着crosstalk，而DELLA 蛋白就是连接各种信号途径之间的节点之一，植物可以通过DELLA 蛋白整合外界环境刺激和内部激素信号，从而弹性调控植物在不同环境情况下的生长发育。
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