百萨偃麦草染色体5J特异标记的开发与应用(3)
1.3分子标记分析
1.3.1 DNA的提取
采用CTAB法，主要步骤参考文献[8]：
1.3.2 PCR扩增
PCR扩增体系（10 µL）包括模板DNA 1.5 µL (30 ng/µL)；Primers 0.5 µL (10 µmol•L-1)；10 × easy Taq buffer (Mg2+ ) 1.5 µL；dNTP 0.4 µL (2.5 mmol•L-1)；Taqase 0.1 µL (5 UµL-1)；加ddH2O至10 µL。
PCR反应程序：94℃预变性 3 min；94 ℃ 30 s，退火温度根据引物调整，45 s，72 ℃ 1 min 10 s，33个循环；72 ℃ 10 min；然后4 ℃保存。
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