摘要:水稻是我国重要的粮食作物,随着社会经济的发展,人民生活水平的不断提高,水稻品质育种越来越受到重视,稻米中最主要的营养物质是淀粉,其对水稻品质有着重大影响。挖掘参与水稻淀粉合成途径中的关键基因及研究其调控网络具有重要的理论意义和应用价值。本研究以稳定遗传的粉质突变体F41为材料,与籼稻品种Dular配组后,利用 F2 群体该突变基因进行定位,最终将其定位在第三号染色体上在分子标记 F9 和 F11 之间,其物理距离为 536143bp,为后续研究该基因的功能奠定了基础。35245 毕业论文关键词:水稻;粉质突变体;淀粉;基因定位
Gene mapping of floury endosperm mutant F41 in rice
Abstract: Rice is the major crops in China. With the development of market economy and improvement of people’s living standards. It has been taken more attention in the rice quality breeding. Starch is the most important nutrition in rice, it has a great influence on the rice quality. Tapping new key gene and regulatory networks involved in the starch synthesis pathway of rice has crucial theoretical significance and application value. In this study, we screened a stable inherited floury endosperm mutant N83, then crossed with Nipponbare, one cultivar of indica rice. Using the progeny of the hybrid, the N83 locus was mapped to a region in the chromosome 3 delimited by two SSR markers F9 and F11.The physical distance of the markers is 536143bp. this result lays the foundation for the future study of the gene.
Key words: rice;floury endosperm mutant;starch;gene mapping
目 录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1材料与方法4
1.1 材料 4
1.2 实验方法 4
1.2.1 突变体与野生型的表型鉴定4
1.2.2 种子发苗4
1.2.3 水稻总 DNA 的提取方法(CTAB 法)4
1.2.4 PCR 扩增5
2 结果与分析5
2.1 表型鉴定结果5
2.2 初连锁结果6
2.3 初定位结果6
2.4 精细连定位结果6
3讨论 7
致谢7
参考文献7
图1 基因定位里连锁图7
表1 加密的分子标记的部分带型数据表6
表2 加密分子标记的序列6
水稻粉质突变体F41的基因定位
淀粉是水稻籽粒胚乳中的主要贮藏物质,由支链淀粉和直链淀粉组成,两者的含量及比例与稻米的品质相关联,因而深入研究调控稻米籽粒中淀粉合成的关键因子及其调控网络对于改善稻米品质具有重要理论指导意义。ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)、颗粒结合淀粉合成酶(Granule-bound starch synthase,GBSS)、可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase, SSS)、淀粉分支酶(Starch branching enzyme, SBE)、淀粉去分支酶(Starch debranching enzyme, DBE)是淀粉合成过程中的五种关键酶[1]。 AGPase 是一种异源四聚体,由两种不同结构的亚基组成[2]。 AGPase 催化葡萄糖-1-磷酸与 ATP 形成焦磷酸和 ADPG(ADP-葡萄糖),ADPG 是淀粉生物合成的最初葡萄糖基供体, 是淀粉合成的底物[3, 4]。淀粉分支酶(SBE)通过水解直链淀粉的 α-1,4-糖苷键,把切下的短链转移到 C6 氢氧键末端形成 α-1,6-糖苷键。淀粉去分支酶(DBE)作用过程与 SBE 相反,在淀粉合成中起最后的修饰作用[5, 6]。 淀粉合成酶催化链的延伸。对水稻的整个基因组以及cDNA 的深入研究表明淀粉合成酶的基因家族有 10 个基因组成,通过对水稻和其他植物的淀粉合成酶蛋白进行多序列比对分析将这 10 个基因分成 5 类:可溶性淀粉合成酶 I(SSI)、 SSII、 SSIII、 SSIV和颗粒结合淀粉合成酶(GBSS)[7]。在水稻中, SSI 有1个基因, SSII 有3个基因,SSIII、SSIV和 GBSS 各有2个基因。基于瞬时表达模式,又可将这 10 个基因分为 3类: 第一类,早期表达类型(SSII-2、III-1,GBSSII),他们在籽粒灌浆早期阶段表达;第二类,后期表达类型(SSII-3,III-2,GBSSI),在籽粒灌浆的中后期表达;第三类,组成型表达型(SSI、II-1、IV-1、IV -2),在籽粒灌浆的整个阶段表达都比较稳定。 GBSS 主要参与直链淀粉的合成,SS主要参与支链淀粉的合成[1]。