芽孢杆菌D1菌株的基因组测序和突变株基因文库构建(2)
有些厌氧微生物利用苯甲酰-CoA的还原途径降解4HBA。这个途径的第一步是CoA连接酶（CoA ligase）把4-羟基苯甲酸转化成4-羟基苯甲酰-CoA（4-hydroxybenzoyl-CoA）。然后，4-羟基苯甲酰-CoA还原酶（4-hydroxybenzoyl-CoA reductase）将4位的羟基去掉生成苯甲酰-CoA（benzoyl-CoA）。苯甲酰-CoA的降解是逐步还原苯环的双键生成2-氧环己甲酰-CoA（2-oxocyc lohexanecarboxyl-CoA），然后开环生成pimelyl di-CoA，最后进入三羧酸循环[6]。
芳香族化合物的降解过程中，芳香环的开环是一个重要步骤
紫外光线照射：UV照射主要引起点突变，较少引起染色体突变。分子突变不是紫外光线的直接光化作用，而是生物进行修复的时出现的顺序错误。由于每一修复时间出现错误的几率很小，所以若想获得经紫外线照射产生的基因突变，必须做大量的实验统计。
经紫外线最适时间照射过的突变芽孢杆菌菌株即构成了基因文库，对此菌株进行筛选，筛选出高产量的突变菌株，并进行冷藏保存。
1 材料与方法
1.1菌株材料
D1菌株为本实验室保藏菌株
1.2主要试剂
1.2.1生化试剂与分子生物学试剂
（1） 酶类
Taq DNA聚合酶：上海生工生物科技有限公司
蛋白酶K（10 mg/ mL）：用超纯水配成10 mg/mL，-20℃保存
溶菌酶（10 mg/mL）：用超纯水配置成10 mg/mL，-20℃保存