摘要：已有转录组分析结果表明，黄花马蹄莲（Zantedeschia elliotiana）与胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种（Pectobacterterium carotovorum subsp。 carotovorum）（PccS1）活体互作过程中，在不同时间点，均有数百个基因差异表达。其中包括编码核糖体小亚基甲基转移酶的rsmA基因。为了探究rsmA基因对胡萝卜软腐果胶杆菌的致病机制，本研究采用同源重组的方法成功构建了rsmA基因的缺失突变体（ΔrsmA），结果表明：与野生型菌株相比，缺失突变体ΔrsmA菌株的致病能力上升；在相关生物学特性中，ΔrsmA菌株的游动性下降，沉降性、生物膜形成能力无明显变化；致病因子中，ΔrsmA菌株的三种胞外分解酶活性均无明显变化。同时，ΔrsmA菌株产生碳青霉烯抗生素的能力下降。初步说明，rsmA对PccS1的致病力具有负调控作用，其调控机制有待进一步研究。82395

毕业论文关键词：Pcc；rsmA；致病性

Functional research of rsmA disease-causing genes on Pectobacterterium carotovorum subsp。 carotovorum

Abstract： Previous transcriptiomes of Pectobacterium carotovorum subsp。 carotovorum in the course of infection on Zantedeschia elliotiana in vivo at different time-points highlighted hundreds of genes differential expressed, including rsmA, a gene encoding ribosomal small subunit methyltransferase。 To explore its roles for pathogenicity and relevant biological characteristics in P。 carotovorum subsp。 carotovorum, in this study, the gene deletion mutant, ΔrsmA, was constructed by using homologous recombination。 Compared with the wild-type PccS1, the mutant ΔrsmA, showed significantly increased the virulence on Brassica pekinensis, exhibited reduction in motility and the production of carbapenem, but no changes in biofilm formation, sedimentation and the activities of three exo-enzymes。 Our results suggest that rsmA negatively regulates the virulence of Pcc, and the mechanism underlying in it is still remaining to be further studied。

Key words: Pcc; rsmA; pathogenicity

目  录

摘要1

关键词1

Abstract1

Key words1

引言（或绪论）1

1材料与方法2

1。1材料 2

1。1。1供试菌株和质粒2

1。1。2试剂和仪器2

1。1。3 培养基、抗生素及抗生素浓度2

1。1。4引物及限制性内切酶3

1。2缺失突变体的构建3

1。3致病性的测定4

1。4相关生物学特性检测4

1。4。1游动性测定4

1。4。2沉降性测定4

1。4。3生物膜测定4

1。5部分致病因子测定4

1。5。1纤维素酶活性测定4

1。5。2果胶酶活性测定4

1。5。3蛋白酶活性测定4

1。6碳青霉烯抗生素测定5

2结果与分析5

2。1突变菌株的构建5

2。2致病性测定结果5

2。3生物学特性测定结果5

2。4部分致病因子测定结果6

2。5碳青霉烯抗生素测定结果6

3讨论7

致谢7

参考文献7

RsmA基因在胡萝卜软腐果胶杆菌致病过程中 的致病相关功能分析     

细菌性软腐病是一种世界性病害，胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种是引起细菌性软腐病的主要病原菌，它能致使马蹄莲全身组织软腐。胡萝卜软腐果胶杆菌除危害马蹄莲外,还可危害君子兰、郁金香、风信子、仙人掌、辣椒、茄子等多种观赏植物和蔬菜。论文网

Pcc主要通过分泌多种细胞壁降解酶、植物毒素等侵染寄主植物。如:果胶酶,纤维素酶,蛋白酶等细胞壁降解酶。其中,果胶酶被认为是Pcc最主要的致病因子[1]。这些酶分解并利用中间薄层和细胞壁的果胶质,造成组织瓦解,细胞破坏及细胞质渗漏,从而造成软腐病的发生[2]。