（3）蛋白酶检测培养基

10%脱脂牛奶：称取脱脂奶粉10。0 g，用无菌水溶解并定容至100 mL，115℃，灭菌15 min。

蛋白质酶检测培养基：LB固体培养基100 mL + 10%脱脂牛奶10 mL。

（4）果胶酶检测培养基

将0。4 g酵母提取物、 0。4 g (NH4)2SO4、 4 mL 50%的甘油、0。4 g MgSO4、 0。5 g/100 mL多聚半乳糖醛酸钠（最后加）、 80 mL磷酸盐缓冲液（15 g Na2HPO4 + 0。7 g NaH2PO4·H2O + 1 L H2O, 调pH至8。0）、细菌琼脂粉（最后加）1。5 g/100 mL，加纯水搅拌溶解后定容至400 mL，以100 mL为一瓶分装后加入多聚半乳糖醛酸钠和细菌琼脂粉，121℃灭菌20 min。

（5）纤维素酶检测培养基

将0。1 g/100 mL羧甲基纤维素钠（最后加）、 2 g酵母提取物、 0。4 g (NH4)2SO4、 1。6 mL 50%甘油、 0。04 g MgSO4、 8 mL 50×磷酸盐缓冲液(350 g K2HPO4 + 100 g KH2PO4 + 1 L ddH2O, 调pH至6。9 – 7。1）、 1。5 g/100 mL细菌琼脂粉（最后加），加纯水搅拌溶解后定容至400 mL，以100 mL为一瓶分装后加入羧甲基纤维素钠和细菌琼脂粉，121 ℃灭菌20 min。

（6）本实验所用抗生素有硫酸庆大霉素(Gm)，使用终浓度50 μg·mL-1、硫酸卡那霉素(Km)，使用终浓度50 μg·mL-1、利福平(Rif)，使用终浓度100 μg·mL-1。

1。1。4  引物及限制性内切酶    本实验所用引物及限制性内切酶见表2。