天然防腐剂聚赖氨酸对黄曲霉生长的形态学研究(2)
ε- 聚赖氨酸，作为一种天然防腐剂，具有优良的防腐性能和和巨大的商业潜能[6-9]。它是一种天然的微生物代谢产物，是经分离提取精制而获得的发酵产品[10]。在日本，ε- 聚赖氨酸已被批准作为防腐剂添加于食品中，广泛用于各类食品中[11-14]。ε- 聚赖氨酸作为一种天然防腐剂，对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、酵母菌以及霉菌等都有很好的抑制作用，所以广泛应用于各类食品中且只需要微量就可以起到很好的抑菌效果，因此基本不会改变食品的风及质地等[15, 16]。
本研究主要针对天然防腐剂聚赖氨酸对黄曲霉生长的影响的问题运用微生物学相关知识进行实验设计，以期说明聚赖氨酸对黄曲霉生长的抑制效果，为防治粮食霉变提供依据。
1 实验材料与仪器
1.1 主要实验材料
新鲜马铃薯、琼脂粉、蔗糖、蒸馏水、聚赖氨酸、酒精、黄曲霉菌种（由周口师范学院分子遗传与作物育种重点实验室提供）。
1.2 主要实验器材
名 称 型 号 厂 商
冰箱
电子天平
恒温振荡器
洁净工作台
立式压力蒸汽灭菌器
电热鼓风干燥箱
恒温加热磁力搅拌器
万用电炉
立式显微镜 BCD-215KCM
AL204
HZQ-X300
SW-CJ-2FD
LDZX-50KB
DGF30/14-ⅡAG
CL4型
DL-1
BX-41 青岛海尔股份有限公司
梅特勒-托利多仪器有限公司
河南致达电子有限公司
苏净集团苏州安泰空气技术有限公司
上海申安医疗器械厂
南京实验仪器厂
巩义市英峪予华仪器厂
北京中兴伟业仪器有限公司
北京中显恒业科技有限公司
另有：游标卡尺、药匙、接种环、培养皿、移液枪（0-200 μL）及配套枪头、移液管（1-10 mL）、试管（10 mL）、烧杯（1000 mL、50 mL）、玻璃棒、吸耳球、锥形瓶（50 mL、100 mL）、、电热炉、烧杯(1000 mL、50 mL若干)、棉塞、涂布棒、滤纸、一次性手套、棉线、封口膜等。
将需要灭菌的玻璃仪器在高压灭菌锅内121 ℃灭菌20 min备用。
2 实验方法
2.1 培养基的配制
根据相关资料配制PDA固体培养基，121 ℃高压灭菌20 min，用于后续实验中菌种活化、菌悬液制备及抑菌实验。
2.2 黄曲霉菌种的活化及孢子悬液的制备
取保存黄曲霉菌种的固体培养皿在无菌操作下打开，用接种环挑取适量菌种于10 mL生理盐水中，摇匀，制备菌种悬浮液。然后，取少量悬浮液涂布到事先准备的PDA固体培养基上于28 ℃培养24 h活化。如此培养活化3代后,并用无菌水逐级稀释，同时进行平板计数，稀释至7.0×10² CFU/mL。将制好的孢子悬液放入冰箱，4 ℃培养备用。
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